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AlwI
AlwI图片
限制酶产地:国产限制性内切酶


产品名称
限制性内切酶AlwI
产品介绍
  • 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
  • 限制性内切酶酶切位点:GGATC(4/5)

产品来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自洛菲不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)(R. Morgan)的 AlwI 基因。

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA(dam-)所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 50%
    NEBuffer™ r2.1: 50%
    NEBuffer™ r3.1: 10%
    rCutSmart™ Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 阻断酶切
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 不敏感

    同裂酶

    AclWI
    BinI+
    BspPI

  • 注意事项

    1. AlwI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基突出的 5´ 末端,它比平末端更难连接。
    2. dam 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息,请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。
    3. 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
    4. 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性

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