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BsaXI
BsaXI图片
限制酶产地:国产限制性内切酶


产品名称
限制性内切酶BsaXI
产品介绍
  • 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • 酶切位点:(9/12)ACNNNNNCTCC(10/7)

产品来源

嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)25B(Z. Chen)

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 50%
    NEBuffer™ r2.1: 100%
    NEBuffer™ r3.1: 10%
    rCutSmart™ Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 C

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    500 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% Triton® X-100
    pH 7.6 @ 25℃

    热失活

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 不敏感
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 不敏感

  • 注意事项

    1. BsaXI 切割 DNA 底物两次,切下其识别位点后产生一个27 碱基对的片段,该片段包含 5 个碱基的 3' 突出端。
    2. 由于 BsaXI 与 DNA 结合,建议在 16 小时的温育过程中添加不超过 2 个单位的酶量。
    3. 在 NEBuffer r1.1 和 NEBuffer r2.1 缓冲液中可能出现星号活性。
    4. 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
    5. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化不敏感

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