肉芽肿性曼氏杆菌病PCR检测试剂盒实验注意事项：

1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；

2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；

3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。

主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

产品名称：肉芽肿性曼氏杆菌病PCR检测试剂盒

英文名称：Mannheimia granulomatisPCR

编号：GOY-M0634

分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

它具有下列特点：

1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。

2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物，能专一性检测出样品中的大豆成分，但不能检测其他非大豆成分。

3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。

4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。

5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%，对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。

定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次Radix polygoni multiflori preparata制何首乌LAMP鉴定试剂盒       负20度 一年24周 低温

定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次Radix astragali preparata炙黄芪LAMP鉴定试剂盒   负20度 一年24周 低温

NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C  利钠肽受体C体进口/国产NFIC  核因子1C型体

NPY/Neuropeptide Y  神经肽Y体进口/国产IKAROS  锌指蛋白IKAROS体

NPY2R  神经肽Y受体2体进口/国产Dbx2  大发育同源蛋白2体

HLA DM  组织相容性复合体α体进口/国产HLX1  同源异型盒因HLX1蛋白体

NPY1R  神经肽Y1受体体进口/国产GTF2H1  通用转录因子2H肽1体

NQO1  醌氧化还原酶体进口/国产PHF8  组蛋白赖去化酶PHF8体

GluR1/AMPA  谷受体1体进口/国产KIF11/Eg5/TRIP5  驱动蛋白样蛋白1体（状激受体相互作用蛋白5）
肉芽肿性曼氏杆菌病PCR检测试剂盒生长调节致癌基因α/黑素瘤生长刺激因子检测试剂盒20mg

 mCF, 小鼠心脏成纤维细胞球亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis

Bz2'脱氧胞苷亚酰单体 质量>98% BzdC Phosphoramidite

 柠檬串珠 Leuconostoc citreum苜蓿中华根瘤 Sinorhizobium meliloti

匹多莫德 质量>99%,BR Pidotimod

 小鼠关节软骨细胞完全培养戊糖杆 Lactobacillus pentosus

羟 质量>98% Hydroxychloroquine Sulfate

 腊状芽胞杆 Bacillus cereusSaos2(人骨肉瘤细胞)

匹多莫德（标准品） 质量含量测定 Pidotimod

 尔酵母 Saccharomyces willianus柄金钱(金针菇) Flammulina velutipes

酰 质量>99% Acetazolamide

 香菇 Lentinula edodes苏云金芽胞杆苏云金变种 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis

O6苄鸟呤，MGMT 的抑制 质量>98%,MGMT 的抑制 6OBenzylguanine(O6BG)

 BC022(人细胞)中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)

竹红(标准品) 质量HPLC≥98%,标准品 Hypocrellin

 无花曲 Aspergillus ficuum泡盛曲 Aspergillus awamori

米龙 质量>98% Fluorometholone
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。