自备仪器和用品: 分光光度计、离心机、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏
产品名称:线粒体异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)试剂盒说明书
产品货号:GOY-016625
检测方法:可见分光光度法 微板法
产品规格: 48样 96样
产品分类:呼吸代谢途径系列
测定步骤:产品仅用于科研
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入250μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项
1、试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
使用说明:
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用百奥莱博生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A腐草霉素质量规格:≥97%,进分Phleomycin
ERBB4 Others Human ErbB4 / HER4 细胞裂解液 (阳性对照) 寡霉素质量规格:>92%,进分Oligomycin, from Streptomyces
小鼠纹状体神经元MN-s纺锤菌素质量规格:≥98%,进分Netropsin di
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 细胞裂解液 (阳性对照) 头孢菌素C锌盐质量规格:美国进口Cephalosporin C zinc salt
胚肺成纤维细胞;MRC-5精胺氮氧化加合物质量规格:美国进口Spermine NONOate
三(4,7-二苯基-1,10-菲绕啉酯)氯化钠钌(1mM 溶液) Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) salt solution 质量规格:1mM,BC RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISA试剂盒大鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
胰蛋白酶原 Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 质量规格:BC 小鼠二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)ELISA试剂盒 ,英文名: DHODH ELISA Kit
色胺(>98%,BR) Tryptamine 质量规格:>98%,BR 人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA检测试剂盒HumanChromogranin,CgAELISAKit 96T/48T
三氧化钨(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 质量规格:>99%,BC 大鼠前列腺素H2(PGH2)试剂盒 Rat Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit
碳化钨200(>99%,BC) Tungsten carbide-200 质量规格:>99%,BC 英文名称Ratai-thrombieceptorELISAKit大鼠抗凝血酶受体(A)规格:96T/48T
钨粉(200目)(>99.8%,BR) Tungsten powder 质量规格:>99.8%,BR 离子膜通道转运功能检测试剂盒20
钨酸(>98%,BC) Tungstic (VI) acid 质量规格:>98%,BC ELISAKitCpG-ODN人未甲基化寡聚脱氧核苷酸规格:48T/96T
震颤真菌(>98%,BC) Verruculogen from Penicillium verruculosum 质量规格:>98%,BC 小鼠二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)ELISA试剂盒 ,英文名: DPYD ELISA Kit
羊毛脂 Wool fat 质量规格:BR 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA检测试剂盒HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 96T/48T
5--4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸钠盐 X-GLUC, salt 质量规格:>98%,分子生物学级 大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)试剂盒 Rat prostaglandin F syhase,PGFS ELISA Kit
线粒体异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)试剂盒说明书人铁调素(Hepc)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:HAMP, Hepcidin Antimicrobial Peptide Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组Hepc浓度