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组织总磷含量检测试剂盒(可见分光光度法)
组织总磷含量检测试剂盒(可见分光光度法)图片
包装:50管/48样


产品介绍

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率,进而为合理施肥提供依据。

总磷经消化后,转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,一定条件下,钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量,进而可计算出组织中总磷含量。

产品内容:

试剂一:液体10ml×1瓶,4℃保存(强腐蚀性,强氧化性)。

试剂二:液体11ml×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×2瓶,4℃避光保存。临用前配制,加入10ml蒸馏水,溶解后再加入5ml试剂二,混匀。

标准品:液体1ml×1支,1mmol/L无机磷标准液,4℃保存。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水和浓硫酸。

操作步骤:

一、有机磷消化:

取带盖试管,进入精确称取约0.1 g组织,加浓硫酸1.0 ml,盖紧(防止水分散失)后沸水浴10min左右,待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后,加试剂一200μL,充分混匀,盖紧后继续沸水浴,直到溶液呈透明状,取出室温冷却后,加蒸馏水3.8 ml,充分混匀;室温,10000rpm,离心10min,取上清液,待测。

二、测定:

1.分光光度计预热30min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。

2.打开水浴锅,调节温度到40℃。

3.测定:

试剂名称(μL)空白管标准管测定管
标准液
50
上清液

50
蒸馏水500450450
试剂三500500500

混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10min后于660nm测定吸光度,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。

三、组织总磷含量计算:

总磷含量(mmol/g FW)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W=0.005×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

C标准液:1mmol/L;V总:上清液总体积,5ml=0.005 L。W:样品质量,g。

注意事项:

1、试剂三需临用前配制,限当天使用。

2、测定前先用1~2个样品做预实验,如吸光值大于0.8,需用蒸馏水做相应稀释。

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