描述
我们的产品Live-Dead Cell Staining Kit被用于同时荧光染色活细胞和死细胞。该试剂盒包含两种染料-钙黄绿素-AM (Calcein-AM) 和碘化丙锭 (PI),分别染色活细胞和死细胞。
Calcein-AM是Calcein的乙酰氧基甲酯,具有高度亲脂性,且可渗透细胞膜。尽管Calcein-AM本身不是荧光分子,但在经过活细胞中的酯酶消化后,它将转化为Calcein,发出强烈的绿色荧光 (最大激发波长:490 nm,最大发射波长:515nm)。因此,Calcein-AM仅染色活细胞。
相反,PI(一种核染色染料)不能穿过活细胞膜。它能够穿过死细胞膜的无序区域到达细胞核,并插入细胞核的DNA双螺旋中,发出红色荧光(最大激发波长:535 nm,最大发射波长:617 nm)。
由于calcein和PI-DNA均可在490 nm处激发,因此可以通过荧光显微镜或流式细胞仪同时监测活细胞和死细胞。在545 nm激发下,只有死细胞才能发出红色荧光。由于最佳的染色条件会因细胞系的不同而变化,因此我们建议应分别确定PI和Calcein-AM的合适浓度。
请注意,PI被怀疑具有高度致癌性;需要谨慎处理。
组份和存储
| 500 Tests | 1000 Tests |
Calcein-AM Solution (2 mM) | 50 μL | 50 μL × 2 |
PI Solution (1.5 mM) | 150 μL | 150 μL × 2 |
储存于-20°C,避光。 Calcein-AM容易被水分水解。请保持干燥,使用后盖紧盖子。 |