细胞色素C单克隆抗体

商品属性

产品介绍
英文名称Cytochrome C Mouse mAb

中文名称细胞色素C单克隆抗体

别    名CytC; CYC; CYCS; Cytochrome c somatic; HCS; CYC_HUMAN; Cytochrome c; MSA06; THC4.  

研究领域肿瘤  心血管  细胞生物  神经生物学  细胞凋亡  线粒体  

抗体来源Mouse

克隆类型Monoclonal

克 隆 号6B10

交叉反应Human,Mouse,Rat

产品应用WB=1:2000-20000,IHC-P=1:200-800,IHC-F=1:200-800,IF=1:200-800,ICC/IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量12 kDa

检测分子量14.4

细胞定位细胞浆 线粒体

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原Recombinant human Cytochrome C Protein

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein G

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍Cytochrome C is an electron transporting protein that resides within the intermembrane space of the mitochondria, where it plays a critical role in the process of oxidative phosphorylation and production of cellular ATP. An increasing amount of interest has been directed toward the role which cytocrome C has been demonstrated to play in apoptotic processes. Following exposure to apoptotic stimuli, cytochrome C is rapidly released from the mitochondria into the cytosol, an event which may be required for the completion of apoptosis in some systems. Cytosolic cytochrome C functions in the activation of caspase 3, an ICE family molecule that is a key effector of apoptosis.

靶点与功能

细胞色素C（Cytochrome C, Cyt C）是线粒体电子传递链的关键蛋白，位于线粒体内膜间隙，通过血红素铁离子（Fe²⁺/Fe³⁺）的氧化还原传递电子，参与ATP生成。当细胞受到凋亡刺激（如DNA损伤、氧化应激）时，Cyt C会从线粒体释放至胞质，与Apaf-1结合形成“凋亡小体”，激活caspase-9，最终启动 caspase级联反应导致细胞凋亡。其释放是线粒体凋亡通路的“分子开关”，也是区分凋亡与坏死的重要标志物。

实验操作关键要点

WB检测（凋亡细胞模型）：

样本制备：使用线粒体/胞质分离试剂盒分离胞质组分，避免线粒体破裂导致假阳性；

电泳条件：15% SDS-PAGE凝胶（因分子量小），恒压120V电泳60分钟，转膜选用0.22μm PVDF膜；

抗体孵育：兔单抗推荐1:2000稀释（5%脱脂奶粉+TBST），4℃孵育过夜，曝光时间10-30秒（避免信号过强）。

IF凋亡定位（Hela细胞）：

染色步骤：4%多聚甲醛固定15分钟，0.2% Triton X-100透化10分钟，5%驴血清封闭30分钟；

共染策略：Cyt C抗体（绿色荧光）与线粒体 marker（Tom20，红色荧光）共染，正常细胞呈“红绿共定位”（黄色），凋亡细胞绿色信号弥散至胞质；

激发波长：FITC通道（488nm）检测Cyt C，Cy3通道（555nm）检测线粒体。

IHC-P组织染色（脑缺血模型）：

抗原修复：采用柠檬酸钠缓冲液（pH6.0） 微波修复15分钟（95℃），冷却至室温；

阳性定位：正常组织中线粒体呈颗粒状阳性（心肌、脑组织强表达），凋亡区域胞质弥漫性着色；

对照设置：必须包含正常组织（线粒体阳性）和凋亡诱导组织（胞质阳性）作为对照。

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