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英文名称CD25 Recombinant Rabbit mAb

中文名称白介素2受体a链/ICD25重组兔单抗

别    名Interleukin 2 receptor alpha chain; CD 25; CD25; CD25 antigen; IDDM10; IL 2 RA; IL 2 receptor alpha subunit; IL2 RA; IL-2RA; IL2R; IL2RA; IL2RAC; Interleukin 2 Receptor alpha; Interleukin 2 receptor alpha chain; Interleukin 2 receptor; Ly43; p55; T Cell Growth Factor Receptor; TAC Antigen; TCGFR; IL2RA_HUMAN.  

抗体来源Rabbit

克隆类型Recombinant

克 隆 号H12C8

交叉反应Human

产品应用WB=1:500-2000,Flow-Cyt=1ug/Test

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量kDa

检测分子量

细胞定位细胞浆

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

靶点与功能

CD25（IL-2RA）是IL-2受体的α亚单位，为分子量约55kDa的单链糖蛋白，主要表达于活化T细胞（尤其是调节性T细胞Treg）、活化B细胞及NK细胞表面。其核心功能包括：

免疫信号转导：与IL-2结合后形成高亲和力受体（IL-2Rαβγ），激活JAK/STAT通路，调控T细胞增殖与存活；

临床标志物：Treg细胞表面高表达CD25，是免疫抑制微环境的关键指标，与肿瘤免疫逃逸（如黑色素瘤、肺癌）和自身免疫病（如关节炎）密切相关；

治疗靶点：抗CD25单克隆抗体（如达利珠单抗）可特异性清除活化T细胞，用于器官移植排斥反应和自身免疫病治疗。

实验操作关键要点

Flow-Cyt流式检测（外周血Treg细胞）：

样本处理：全血经Ficoll密度梯度离心分离PBMC，PBS洗涤2次后用含2% FBS的PBS重悬（细胞浓度1×10⁶/mL）；

抗体孵育：PerCP标记CD25抗体（1μg/100μL细胞悬液）与APC标记CD4抗体、PE标记Foxp3抗体（胞内染色）共同孵育，4℃避光30分钟；

数据分析：通过CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺表型圈定Treg细胞，正常人群外周血Treg比例参考值为5%-10%（CD4⁺T细胞中）。

WB验证（T细胞活化模型）：

样本制备：Jurkat细胞经PMA（50ng/mL）+离子霉素（1μg/mL） 刺激24小时，RIPA裂解液（含1mM PMSF）冰上裂解30分钟，12000g离心15分钟取上清；

电泳条件：10% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜使用0.45μm PVDF膜（250mA恒流1.5小时）；

抗体孵育：一抗1:2000稀释（5%脱脂奶粉+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗（山羊抗兔）1:5000室温孵育1小时，曝光时间30-60秒。

IHC-P组织染色（淋巴瘤样本）：

抗原修复：石蜡切片脱蜡至水后，用柠檬酸钠缓冲液（pH6.0） 微波修复20分钟（95℃），自然冷却至室温；

阳性定位：肿瘤浸润T细胞细胞膜呈棕黄色线性阳性，弥漫性大B细胞淋巴瘤中CD25⁺T细胞比例与预后负相关；

对照设置：需包含扁桃体组织（阳性对照，活化T细胞阳性）和正常皮肤组织（阴性对照）。

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