人类白细胞抗原E抗体

商品属性

产品介绍
英文名称HLA E Rabbit pAb

中文名称人类白细胞抗原E抗体

别    名HLA class I histocompatibility antigen E alpha chain; DKFZp686P19218; EA1.2; EA2.1; HLA 6.2; HLA class I histocompatibility antigen alpha chain E; HLA class I histocompatibility antigen E alpha chain precursor; HLA-6.2; HLA6.2; HLAE; Lymphocyte antigen; Major histocompatibility complex class I E; MHC; MHC class I antigen E; MHC HLA E alpha 1; MHC HLA E alpha 2.1; HLA-E; QA1.  

抗体来源Rabbit

克隆类型Polyclonal

克 隆 号

交叉反应Human

产品应用IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量37 kDa

检测分子量

细胞定位细胞膜

性    状Liquid

免 疫 原Recombinant human HLA E protein: 22-303/358

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍HLA-E belongs to the HLA class I heavy chain paralogues. This class I molecule is a heterodimer consisting of a heavy chain and a light chain (beta-2 microglobulin). The heavy chain is anchored in the membrane. HLA-E binds a restricted subset of peptides derived from the leader peptides of other class I molecules. The heavy chain is approximately 45 kDa and its gene contains 8 exons. Exon one encodes the leader peptide, exons 2 and 3 encode the alpha1 and alpha2 domains, which both bind the peptide, exon 4 encodes the alpha3 domain, exon 5 encodes the transmembrane region, and exons 6 and 7 encode the cytoplasmic tail. [provided by RefSeq, Jul 2008]

靶点与功能

HLA-E是非经典主要组织相容性复合体Ⅰ类分子，由α链（重链）和β₂微球蛋白（β₂m）组成，通过结合NK细胞表面抑制性受体（如CD94/NKG2A） 传递免疫抑制信号，维持母胎耐受、肿瘤免疫逃逸及病毒感染中的免疫平衡。其异常表达与妊娠并发症、肿瘤转移及自身免疫疾病密切相关，是研究免疫逃逸机制的重要标志物。

实验操作关键要点

WB检测（细胞系/组织样本）：

样本制备：使用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液（如1mM PMSF），冰上裂解30分钟，12000g离心15分钟取上清；

电泳条件：10% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜选用0.45μm PVDF膜（250mA恒流1.5小时）；

抗体孵育：多克隆抗体1:500稀释（5% BSA+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗（山羊抗兔）1:5000室温孵育1小时，曝光时间30-60秒。

IHC-P组织染色（肿瘤/胎盘样本）：

抗原修复：采用柠檬酸钠缓冲液（pH6.0） 微波修复20分钟（95℃），自然冷却后3% H₂O₂阻断内源性过氧化物酶10分钟；

阳性定位：胞膜/胞质呈棕黄色阳性，胎盘滋养层细胞、肿瘤细胞高表达；

对照设置：需包含HLA-E敲除细胞系（阴性对照）和胎盘组织（阳性对照）。

IF免疫荧光共定位：

荧光标记：一抗与CD94抗体（小鼠单抗）共孵育，二抗选用Alexa Fluor 488（抗兔）和Cy3（抗小鼠），37℃避光孵育1小时；

结果判断：HLA-E与CD94在NK细胞表面共定位，呈现黄色合并信号（荧光显微镜400×）。

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