商品属性

产品介绍The protein encoded by this gene phosphorylates the alpha subunit of eukaryotic translation-initiation factor 2 (EIF2), leading to its inactivation, and thus to a rapid reduction of translational initiation and repression of global protein synthesis. It is a type I membrane protein located in the endoplasmic reticulum (ER), where it is induced by ER stress caused by malfolded proteins. Mutations in this gene are associated with Wolcott-Rallison syndrome. [provided by RefSeq, Jan 2010].

商品详情

英文名称phospho-PERK (Thr980) Rabbit pAb

中文名称磷酸化蛋白激酶样内质网激酶抗体

别    名p-PERK(Thr980); PERK(phospho Thr980); PERK(phospho T980); mo(Thr980)/hu (Thr982)/rat(Thr974); HRI; HsPEK; Pancreatic eIF2-alpha kinase; PEK; PRKR like endoplasmic reticulum kinase; WRS; DKFZp781H1925; EC 2.7.11.1; EIF2AK3; Eukaryotic translation initiation factor 2 alpha kinase 3; Heme regulated EIF2 alpha kinase.  

产品类型磷酸化抗体

研究领域肿瘤  细胞生物  免疫学  信号转导  细胞凋亡  转录调节因子  激酶和磷酸酶  

抗体来源Rabbit

克隆类型Polyclonal

克 隆 号

交叉反应Human,Mouse,Rat (predicted: Rabbit)

产品应用IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500,Flow-Cyt=1ug/Test,ICC/IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量119 kDa

检测分子量

细胞定位细胞浆 细胞膜

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human PERK around the phosphorylation site of Thr980: H(p-T)GQ

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

应用范围及推荐稀释比例

免疫印迹（WB）：1:100–500

酶联免疫吸附试验（ELISA）：1:500–1000

免疫组化（IHC-P/IHC-F）：1:100–500（石蜡切片需抗原修复）

免疫荧光（IF）：1:100–500

免疫沉淀（IP）：需用户优化浓度

其他应用：未测试，建议用户根据实验体系优化稀释比例。

保存条件

冻干粉：室温保存至少1个月，-20℃保存≥1年；复溶后（无菌PBS或专用稀释液）2–4℃可稳定保存2周。

液体：-20℃保存1年，避免反复冻融。

使用说明

复溶方法：冻干粉需用无菌蒸馏水或PBS溶解，建议分装为5–10支（如20μL/支），-20℃保存，单次使用避免反复冻融。

实验优化：不同实验系统（如组织类型、样本处理方式）可能需调整抗体浓度，建议预实验确定**条件。

实验操作关键要点

WB检测（信号通路激活验证）：

样本处理：HeLa细胞用10% FBS刺激30分钟（激活ERK-SRF通路），RIPA裂解液（含PhosSTOP磷酸酶抑制剂）冰上裂解20分钟，12000g离心取上清；

电泳条件：10% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜采用0.45μm PVDF膜（250mA恒流1.5小时）；

抗体孵育：Ser77抗体1:1000稀释（5% BSA+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗1:5000室温孵育1小时，曝光时间30秒（需同时检测总SRF和p-ERK1/2作为对照）。

IHC-P组织染色（肿瘤样本）：

抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复20分钟（95℃），自然冷却至室温；

阳性定位：乳腺癌组织细胞核呈棕黄色颗粒状阳性，癌旁组织弱阳性（阳性细胞比例＜10%）；

封闭处理：5%驴血清+0.3% Triton X-100室温封闭1小时，降低非特异性结合。

IF双标实验（核质定位分析）：

推荐与F-肌动蛋白探针（Phalloidin） 共染，激光共聚焦观察p-SRF（Ser77）在血清刺激后从胞质向核内转移的动态过程（刺激15分钟核定位率提升60%）。

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