天冬氨酸蛋白酶ASP4抗体

商品属性

产品介绍
英文名称NAPSIN A Mouse mAb

中文名称天冬氨酸蛋白酶ASP4抗体

别    名NAPSIN A; Asp 4; ASP4; Aspartyl protease 4; KAP; Kdap; Kidney derived aspartic protease like protein; NAP1; NAPA; Napsa; NAPSA_HUMAN; Napsin 1; napsin A aspartic peptidase; Napsin A precursor; Napsin-1; Napsin-A; Pronapsin A; SNAPA; TA01/TA02.  

抗体来源Mouse

克隆类型Monoclonal

克 隆 号10A12

交叉反应Human,Mouse,Rat

产品应用IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量39 kDa

检测分子量

细胞定位分泌型蛋白

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse NAPSIN A

亚    型IgG1, Kappa

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液Liquid in PBS containing 50% Glycerol, 0.5% BSA and 0.02% Proclin300.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍Napsin A is an aspartic proteinase that belongs to the peptidase A1 family and plays a role in pneumocyte surfactant processing. It is a 420-amino acid polypeptide consisting of a 24-residue signal peptide, a 40-amino acid propart, the mature enzyme of 336 amino acids, and a C-terminal extension of 18 residues. The mature Napsin A protein contains 3 predicted disulfide bonds, 3 potential N-linked oligosaccharide attachment sites, an RGD motif, a recognition motif for integrin binding, in the C terminus, immediately before a 4-amino acid insert that is unique to aspartic proteinases. Highest levels of Napsin A have been detected in adult lung (type II pneumocytes), fetal lung, and kidney tissues. Napsin A is also expressed at lower levels in adult spleen and at very low levels in peripheral blood leukocytes. Human napsin A shares 72.6% sequence identity with the mouse homolog.

靶点与功能

NCAM1（CD56）作为免疫球蛋白超家族粘附分子，核心功能与重组兔单抗的优势体现在：

多亚型识别：可同时结合NCAM1的3种主要亚型（120kDa/GPI锚定、140kDa/180kDa跨膜型），适用于不同剪切变体的表达分析（如神经发育中180kDa亚型向140kDa亚型的转换）；

神经再生价值：通过同源/异源粘附介导神经元迁移和突触形成，脊髓损伤模型中NCAM1⁺轴突再生距离与运动功能恢复正相关（重组兔单抗可精准量化再生轴突密度）；

肿瘤免疫双标：在神经内分泌肿瘤（如小细胞肺癌）中，NCAM1与Synaptophysin共染阳性率>95%，重组兔单抗的高特异性可减少交叉反应导致的假阳性。

实验操作关键要点

IF神经突触共定位（原代神经元）：

细胞处理：大鼠海马神经元培养14天（成熟突触形成期），4%多聚甲醛固定15分钟，0.1% Triton X-100透化10分钟；

双标策略：NCAM1重组兔单抗（1:500，Alexa Fluor 488绿色）与PSD95抗体（突触后致密区标志物，红色）共染，激光共聚焦观察突触前膜NCAM1与突触后PSD95的共定位系数（正常神经元共定位率>60%）。

WB亚型分析（脑发育模型）：

样本制备：E18胚胎鼠脑 vs 成年鼠脑皮层组织，RIPA裂解液（含1mM PMSF+磷酸酶抑制剂）冰上裂解30分钟；

电泳条件：7.5% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜使用0.45μm PVDF膜（300mA恒流2小时）；

结果差异：胚胎期以180kDa亚型为主（促进神经元迁移），成年期140kDa亚型占比>70%（维持突触稳定）。

IHC-P肿瘤组织染色（小细胞肺癌）：

抗原修复：EDTA缓冲液（pH9.0）高压修复10分钟（石蜡切片），肿瘤细胞胞膜呈棕黄色强阳性；

量化优势：重组兔单抗背景低，可通过ImageJ计算阳性细胞比例（>20%为NCAM1高表达，提示预后不良）；

对照设置：肺腺癌组织（阴性对照）和神经母细胞瘤（阳性对照）。

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