中分子量神经丝蛋白重组兔单抗

商品属性

产品介绍
英文名称NEFM Recombinant Rabbit mAb

中文名称中分子量神经丝蛋白重组兔单抗

别    名Neurofilament medium polypeptide; 160 kDa neurofilament protein; neurofilament 3; Nefm; 150kDa medium; NEF 3; NEF3; NEFM; Neurofilament 3; Neurofilament medium polypeptide; Neurofilament protein medium; Neurofilament triplet M protein; Neurofilament3; NF M; NF160; Neurofilament-M; Neurofilament M; NFM; NFM_HUMAN.  

研究领域细胞生物  免疫学  神经生物学  

抗体来源Rabbit

克隆类型Recombinant

克 隆 号7G3

交叉反应Human

产品应用WB=1:500-2000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500,ICC/IF=1:100-200

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量102 kDa

检测分子量

细胞定位细胞浆

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原A synthesized peptide derived from human NEFM: 650-700/916

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍Neurofilaments are the 10nm or intermediate filament proteins found specifically in neurons, and are composed predominantly of three major proteins called neurofilament light (NF-L), neurofilament medium (NF-M) and neurofilament heavy (NF-H). Neurofilament medium runs on SDS-PAGE gels in the range 145-170 kDa, with some variation in different species. Antibodies to this protein are useful to identify neurons and their processes in tissue sections and in tissue culture. Neurofilament medium can also be useful in studies of neurofilament accumulations seen in many neurological diseases, such as Lou Gehrig's disease or Alzheimer's disease.

靶点与功能

巢蛋白（Nestin，NES）是V型中间丝蛋白（分子量约200kDa），核心功能与研究价值包括：

干细胞特性标志物：特异性表达于神经上皮干细胞、放射状胶质细胞及未分化神经前体细胞，在神经元分化后逐渐下调（神经发生过程中与β-III Tubulin表达负相关）；

神经再生指示：脑缺血/创伤后，巢蛋白⁺细胞在损伤周边区域增殖（7天达峰值），参与胶质瘢痕形成和内源性修复；

肿瘤干细胞关联：在胶质母细胞瘤（CD133⁺巢蛋白⁺亚群）、乳腺癌（ALDH⁺巢蛋白⁺干细胞） 中高表达，与化疗耐药和复发风险正相关（巢蛋白高表达患者5年生存率降低35%）。

实验操作关键要点

IF神经干细胞鉴定（原代培养）：

细胞固定：4%多聚甲醛室温固定15分钟，0.2% Triton X-100透化10分钟；

双标策略：与Sox2抗体共染（干细胞核标志物），巢蛋白（绿色，胞质丝状网络）与Sox2（红色，核定位）共表达率>90%提示干细胞纯度达标；

分化追踪：诱导分化7天后，巢蛋白表达下调，β-III Tubulin⁺神经元比例>30%。

WB检测（脑损伤模型）：

样本处理：大鼠脑缺血模型（MCAO）损伤侧皮层组织，RIPA裂解液（含1mM PMSF+磷酸酶抑制剂）冰上裂解30分钟；

电泳条件：6% SDS-PAGE凝胶（因分子量极大），恒压60V浓缩胶、80V分离胶，电泳时间120分钟；

抗体孵育：一抗1:1000稀释（5%脱脂奶粉+TBST），4℃摇床孵育过夜，HRP二抗（抗小鼠/兔）1:5000室温孵育1小时，曝光时间90秒（200kDa处可见主条带）。

IHC-P肿瘤组织染色（胶质母细胞瘤）：

抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复20分钟（石蜡切片），肿瘤干细胞巢蛋白⁺区域呈棕黄色丝状阳性；

阳性对照：胚胎脑皮层组织（室管膜区巢蛋白⁺放射状胶质细胞）；

定量分析：ImageJ计算巢蛋白⁺面积占比，>15%提示高侵袭性肿瘤表型。

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