巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白单克隆抗体

商品属性

产品介绍
英文名称Nestin Mouse mAb

中文名称巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白单克隆抗体

别    名ESTM 46; FLJ 21841; FLJ21841; Intermediate filament protein; Nbla00170; Nes; NEST_HUMAN; Nestin.  

抗体来源Mouse

克隆类型Monoclonal

克 隆 号E2G4

交叉反应Human

产品应用WB=1:500-1000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量178 kDa

检测分子量

细胞定位细胞浆

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原KLH conjugated synthetic peptide derived from human Nestin

亚    型IgG2a, κ

纯化方法affinity purified by Protein G

缓 冲 液PBS, Glycerol, BSA.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍Nestin is a Class VI intermediate filament expressed in the developing central nervous system (CNS) in early embryonic neuroepithelial stem cells. This protein has been widely used as a predominant marker for stem / progenitor cells, glioma cells, and tumor endothelial cells in the mammalian CNS. Furthermore, it is a superior angiogenic marker to evaluate neovascularity of endothelial cells in tumor.

靶点与功能

神经元核抗原（NeuN，即Fox-3）是RNA结合蛋白家族成员（分子量约46-48kDa），核心功能与研究价值包括：

神经元特异性：几乎所有成熟神经元（90%以上）的细胞核/核仁中表达，未成熟神经元、胶质细胞（星形胶质细胞、少突胶质细胞）及非神经细胞不表达，是区分神经元的“金标准”标志物；

研究应用：用于神经元计数（如阿尔茨海默病模型海马区NeuN⁺细胞减少率定量）、神经再生评估（脑卒中后梗死灶周围NeuN⁺新生神经元检测）及神经谱系追踪（与DCX共染标记未成熟神经元向成熟神经元分化）；

疾病关联：在亨廷顿舞蹈症、肌萎缩侧索硬化（ALS）等神经退行性疾病中，NeuN表达稳定性下降，可作为神经元损伤的早期指标。

实验操作关键要点

IHC-P脑组织切片染色：

抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复15分钟（石蜡切片），神经元核信号显著增强；

阳性定位：大脑皮层/海马区神经元细胞核呈棕黄色强阳性，核仁染色更深，胶质细胞核阴性（特异性标志）；

量化分析：ImageJ软件计数海马CA1区单位面积NeuN⁺细胞数（正常小鼠约120-150个/mm²），需排除边缘效应区。

IF神经元共标实验：

与GFAP抗体（星形胶质细胞标志物）共染，NeuN（红色，核定位）与GFAP（绿色，胞质定位）无重叠，可清晰区分神经元与胶质细胞；

与NeuN磷酸化抗体（如pSer47）共染，可研究神经元活性依赖的NeuN磷酸化动态变化（如电刺激后核仁磷酸化水平升高）。

WB验证（脑组织裂解液）：

样本制备：大鼠海马组织用含蛋白酶抑制剂（1mM PMSF） 的RIPA裂解液冰上裂解30分钟，12000g离心取上清；

电泳条件：10% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜使用0.45μm PVDF膜（200mA恒流1小时）；

抗体孵育：一抗1:1000稀释（5% BSA+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗（山羊抗小鼠/兔）1:5000室温孵育1小时，曝光时间30秒（46kDa处可见单一清晰条带）。

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