神经元核抗原单克隆抗体

商品属性

产品介绍
英文名称NeuN Recombinant Mouse mAb

中文名称神经元核抗原单克隆抗体

别    名RFOX3_HUMAN; RNA binding protein fox-1 homolog 3; RBFOX3; Fox-1 homolog C; Neuronal nuclei antigen(NeuN antigen); FOX3; FOX-3; HRNBP3;  

研究领域细胞生物  神经生物学  转运蛋白  表观遗传学  

抗体来源Mouse

克隆类型Recombinant

克 隆 号11D5

交叉反应Mouse,Rat (predicted: Human)

产品应用IHC-P=1:50-200,IHC-F=1:50-200,IF=1:50-200

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量34 kDa

检测分子量

细胞定位细胞核 细胞膜

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原Recombinded human NeuN: 1-100/312

亚    型IgG

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍This gene encodes a member of the RNA-binding FOX protein family which is involved in the regulation of alternative splicing of pre-mRNA. The protein has an N-terminal proline-rich region, an RNA recognition motif (RRM) domain, and a C-terminal alanine-rich region. This gene produces the neuronal nuclei (NeuN) antigen that has been widely used as a marker for post-mitotic neurons. This gene has its highest expression in the central nervous system and plays a prominent role in neural tissue development and regulation of adult brain function. Mutations in this gene have been associated with numerous neurological disorders. Alternative splicing of this gene results in multiple transcript variants encoding distinct isoforms. [provided by RefSeq, May 2017]

靶点与功能

NeuN（Fox-3）是神经元特异性核抗原（分子量46-48kDa），核心研究价值包括：

神经元鉴定金标准：在90%以上成熟神经元的细胞核/核仁中高表达，未成熟神经元、胶质细胞（星形胶质细胞、少突胶质细胞）及非神经细胞不表达，可通过免疫荧光与GFAP（胶质细胞标志物）实现“神经元-胶质细胞”精准区分；

神经退行性疾病标志物：阿尔茨海默病（AD）模型小鼠海马区NeuN⁺细胞数量随病程进展减少（6月龄APP/PS1小鼠较WT减少23%），可量化神经元丢失程度；

神经再生评估：脑卒中后梗死灶周围NeuN⁺/DCX⁺双阳性细胞比例，可反映内源性神经发生水平（正常脑组织几乎无DCX⁺NeuN⁺细胞）。

实验操作关键要点

IF双标实验（神经元-胶质细胞共染）：

样本处理：小鼠脑冰冻切片（厚度10μm），4%多聚甲醛固定15分钟，0.3% Triton X-100透化10分钟；

抗体组合：NeuN重组兔单抗（1:500，Alexa Fluor 594标记，红色核定位）+ GFAP小鼠单抗（1:1000，Alexa Fluor 488标记，绿色胞质），4℃孵育过夜；

结果判读：海马CA1区 NeuN⁺神经元核呈红色，GFAP⁺星形胶质细胞胞质呈绿色，无重叠信号（纯度验证标准）。

IHC-P临床样本染色（AD脑组织芯片）：

抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复15分钟（石蜡切片），抗原修复后用3% H₂O₂阻断内源性过氧化物酶10分钟；

阳性对照：正常人大脑皮层组织（神经元核强阳性），阴性对照：NeuN敲除小鼠脑组织（无信号）；

量化分析：ImageJ软件计数每mm²皮层 NeuN⁺细胞数，AD样本较正常对照减少>30%为显著神经元丢失。

WB验证（神经元分化模型）：

样本制备：iPSC诱导神经元分化第28天，收集细胞用含蛋白酶抑制剂（1mM PMSF） 的RIPA裂解液冰上裂解30分钟；

电泳条件：12% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜使用0.45μm PVDF膜（200mA恒流1小时）；

抗体孵育：一抗1:1000稀释（5% BSA+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗（山羊抗兔）1:5000室温孵育1小时，曝光时间30秒（46kDa处可见特异性条带，未分化iPSC无条带）。

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