神经细胞胞浆蛋白9.5/蛋白基因产物9.5单克隆抗体

商品属性

产品介绍
英文名称PGP9.5 Mouse mAb

中文名称神经细胞胞浆蛋白9.5/蛋白基因产物9.5单克隆抗体

别    名Gracile axonal dystrophy; Neuron cytoplasmic protein 9.5; Park 5; Park5; Parkinson Disease 5; PGP 9.5; PGP9.5; PGP95; Protein gene product 9.5; Ubiquitin C terminal esterase L1; Ubiquitin C terminal hydrolase(neuron specific); Ubiquitin C terminal hydrolase; Ubiquitin carboxyl terminal esterase L1; Ubiquitin carboxyl terminal hydrolase isozyme L1; Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1; Ubiquitin thioesterase L1; Ubiquitin thiolesterase; Ubiquitin thiolesterase L1; UCH L1; UCH-L1; UCHL1; UCHL1_HUMAN.  

抗体来源Mouse

克隆类型Monoclonal

克 隆 号7E9

交叉反应Human,Mouse,Rat

产品应用WB=1:500-2000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,IF=1:100-500

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量25 kDa

检测分子量

细胞定位细胞浆 细胞膜

性    状Liquid

浓    度1mg/ml

免 疫 原Recombinant human UCHL1 protein

亚    型

纯化方法affinity purified by Protein A

缓 冲 液0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件Store at -20℃ for one year.

注意事项This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

PubMedPubMed

产品介绍catalyzes the hydrolysis of ubiquitin carboxy-terminal thiolesters to form ubiquitin and a thiol; may play a role in neuropathic pain [RGD].

Found in neuronal cell bodies and processes throughout the neocortex (at protein level). Expressed in neurons and cells of the diffuse neuroendocrine system and their tumors. Weakly expressed in ovary. Down-regulated in brains from Parkinson disease and Alzheimer disease patients.

靶点与功能

CDK9（Cyclin-Dependent Kinase 9）是P-TEFb复合体催化亚基，通过以下机制调控转录延伸：

激活机制：Thr186位点磷酸化是其激酶活性的“开关”，磷酸化后与Cyclin T1/T2结合形成活性复合物，磷酸化RNA聚合酶II的CTD结构域（Ser2位点），解除转录暂停；

生理功能：调控细胞周期相关基因（如Cyclin D1）、抗凋亡基因（如Bcl-2）的表达，在心肌细胞存活、免疫细胞活化中起重要作用；

病理关联：在Burkitt淋巴瘤（85%）、肝癌（62%）、乳腺癌（53%） 中异常高表达，与肿瘤细胞无限增殖及放疗耐药密切相关，是CDK9抑制剂（如Flavopiridol）疗效评估的标志物。

实验操作关键要点

WB检测激酶活性：

样本处理：Jurkat细胞用PMA（100ng/mL）刺激30分钟，RIPA裂解液（含磷酸酶抑制剂PhosSTOP）冰上裂解20分钟，12000g离心取上清；

电泳条件：10% SDS-PAGE凝胶，恒压80V浓缩胶、120V分离胶，转膜300mA恒流1.5小时（0.45μm PVDF膜）；

抗体孵育：一抗1:1000稀释（5% BSA+TBST），4℃孵育过夜，HRP二抗1:5000室温孵育1小时，曝光时间30秒（需同时检测总CDK9和β-actin作为对照）。

IHC-P组织染色：

抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）微波修复（95℃ 20分钟），自然冷却至室温；

阳性定位：肿瘤细胞核呈棕黄色颗粒状阳性（Thr186磷酸化入核），正常组织弱阳性；

对照设置：需包含CDK9敲除细胞系（阴性对照）和Burkitt淋巴瘤组织（阳性对照）。

IF共定位实验：

推荐与Cyclin T1抗体共染，使用Alexa Fluor 488（绿色，Phospho-CDK9）和594（红色，Cyclin T1），激光共聚焦观察P-TEFb复合体在核内的点状共定位。

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