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细胞简介：大鼠肝星状细胞细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里***器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中***消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝星状细胞(HSC)又名肝贮脂细胞、维生素A贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等，是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞，各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为最终靶细胞。正常情况下，HSC处于静止状态，当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时，HSC的表型由静止型转变为激活型，激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建，此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星状细胞分布于肝脏的Disse间隙内，是合成、分泌细胞外基质的主要来源，在肝纤维化的发生中处于最重要地位。肝星状细胞是肝脏特有的间充质细胞，约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群，肝星状细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分，合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构，还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。此外，肝星状细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。

方法简介：实验室分离的大鼠肝星状细胞采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠肝星状细胞经α-SMA或Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态**

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠肝星状细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。
培养基与环境

推荐培养基：含FBS（胎牛血清）、内皮细胞生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基，如89% 1640培养基+10% FBS+1%双抗 。

培养条件：气相为空气95%、CO₂ 5%，温度37℃ 。

包被要求：培养瓶需经PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）包被 。

收货处理步骤

1. 消毒与观察 75%酒精喷洒培养瓶表面消毒，显微镜下观察细胞状态及有无污染，拍照记录 。

2. 平衡环境 放入37℃培养箱平衡2-3小时，使细胞适应温度和CO₂浓度 。

3. 培养基处理 若细胞密度＜80%，直接补加5-6ml培养基继续培养；若＞80%，可消化传代 。

4. 传代方法 1:2~1:4比例传代，2-3天换液一次，使用0.25%胰蛋白酶消化 。

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传代与冻存

传代特性：原代细胞体外培养周期有限，通常可传2-3代（部分方法显示可传18代以上，需以具体产品说明为准） 。

冻存液：推荐含 DMSO 的血清冻存液（如90% FBS+10% DMSO），程序降温后保存于液氮。

注意事项

质量控制：细胞传代比例建议1:2至1:3，避免过度消化。

污染预防：严格无菌操作，定期检测支原体。

代次限制：原代细胞建议使用前5代，以保持功能稳定性。