细胞简介

鸡气管上皮细胞分离自气管组织；气管(Trachea)，呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C”字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的**道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。

方法简介：实验室分离的鸡气管上皮细胞采用中性蛋白酶-连酶蛋白酶混合消化法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的鸡气管上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1代

消化液：0.25%胰蛋白酶鸡气管上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。

分离与培养流程

组织处理：无菌获取组织后，用PBS清洗并剪碎至1mm³大小；

酶消化：胶原酶/胰酶混合消化（37℃, 10-20分钟），离心收集细胞悬液；

纯化：密度梯度离心或差速贴壁法去除杂细胞（如红细胞、成纤维细胞）；

接种培养：使用组织特异性培养基（如肝细胞专用培养基含生长因子），在37℃、5% CO₂条件下培养。

质量控制标准

纯度验证：免疫荧光检测细胞特异性标志物（如肝细胞需验证CYP450活性）；

无菌检测：排除HIV-1、HBV、HCV、支原体等污染；

活力要求：复苏后存活率≥80%，贴壁率≥70%；

批次一致性：提供细胞计数、活力检测及功能验证报告（如代谢酶活性）。

运输与保存

运输形式：

冻存管（干冰运输，含冻存液：90%血清+10% DMSO）；

培养瓶（常温运输，培养基充满至瓶口）。

保存条件：

液氮（长期，≤-150℃）；

-80℃（短期，≤1个月）。

注：收到细胞需立即检查包装完整性并记录状态。
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