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细胞详述

巨噬细胞源自单核细胞，属于细胞，有多种功能，属不繁殖细胞群，难以长期培养。

巨噬细胞在吞噬和异物和衰老死亡细胞、分泌生物活性物质，调节血细胞生成与参与应答等方面发挥着广泛的生物学作用，是一类在体内发挥重要效应的细胞，为体内的稳态维持和组织防御提供保障。

细胞特性

1)  组织来源于实验动物的正常骨髓组织。

2)  细胞鉴定：CD68或MAC387免疫荧光染色为阳性。

3)  经鉴定细胞纯度高于90%。

4)  不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)  细胞生长方式：圆形，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf原代 巨噬 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
核心操作流程

复苏 冻存管37℃水浴迅速解冻，加入培养基离心（1000 RPM，4分钟），弃上清后重悬接种。

培养 贴壁细胞需用PBS润洗，0.25%胰酶消化1-2分钟，终止后按1:2传代；悬浮细胞直接离心分瓶，推荐使用专用培养基。

冻存 取对数期细胞，用含10%DMSO的冻存液（血清:培养基=1:9）重悬，密度≥1×10⁶/ml，程序降温后转入液氮。

细胞处理指南

接收与初步检查：

75%酒精消毒培养瓶外壁，观察培养基颜色及细胞密度。

显微镜下拍照记录（100X、200X）。

贴壁细胞传代：

吸弃旧培养基，PBS轻柔洗涤。

0.05%胰酶-EDTA消化至细胞变圆，加入终止液终止反应。

离心（1000rpm, 5min）后重悬，接种至新培养瓶（37℃, 5% CO₂）。

悬浮细胞处理：

直接离心收集细胞，更换新鲜培养基后继续培养。

注意事项

质量控制：细胞传代比例建议1:2至1:3，避免过度消化。

污染预防：严格无菌操作，定期检测支原体。

代次限制：原代细胞建议使用前5代，以保持功能稳定性。

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