细胞简介

人晶状体上皮细胞分离自晶状体组织；晶状体源自胚胎发育外胚层，仅含有上皮细胞及其产物，晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开；因而，晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰，又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染，保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡，包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中，晶状体上皮细胞分化和成熟，然后迁移到晶状体内部，产生晶体蛋白，自身也拉长而变成晶状体纤维细胞，并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明，晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控，包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形，呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞，其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关，体外培养是研究其生长规律的主要手段。

方法简介：实验室分离的人晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶人晶状体上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。

细胞培养技术

培养基配方：推荐使用含B-27 Supplement、EGF、bFGF等生长因子的专用培养基，添加青霉素和链霉素防止污染

培养条件：37℃、5% CO₂环境培养，气相成分为95%空气和5%二氧化碳

传代方法：80-90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟，按1:2比例传代

冻存保存：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后转入液氮长期保存

质量控制和检测

实验室分离的细胞需通过以下质量检测：

免疫荧光鉴定：Nestin标志物阳性率≥90%

无菌检测：确保不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌和真菌等污染物

细胞活性：复苏后存活率应≥80%

形态学检查：培养细胞应呈现典型神经前体细胞形态

产品规格和使用说明

产品规格：通常以5×10⁵cells/T25培养瓶形式提供

运输方式：可选择冻存管干冰运输或培养瓶常温运输

接收处理：

冻存细胞：立即复苏或转入液氮保存

培养瓶：静置2-4小时后换液

注意事项：

仅限科研用途

建议在收到细胞后3天内反馈状态

定期拍照记录细胞生长情况
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