产品属性

产品信息

细胞简介：大鼠角膜上皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下：①角膜是**的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能，分三层细胞层，外层即是上皮细胞；②角膜上皮细胞能参与先天性免疫，能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统；③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段，常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

方法简介：实验室分离的大鼠角膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠角膜上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠角膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。
细胞培养技术

培养基配方：推荐使用含B-27 Supplement、EGF、bFGF等生长因子的专用培养基，添加青霉素和链霉素防止污染

培养条件：37℃、5% CO₂环境培养，气相成分为95%空气和5%二氧化碳

传代方法：80-90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟，按1:2比例传代

冻存保存：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后转入液氮长期保存

质量控制和检测

实验室分离的细胞需通过以下质量检测：

免疫荧光鉴定：Nestin标志物阳性率≥90%

无菌检测：确保不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌和真菌等污染物

细胞活性：复苏后存活率应≥80%

形态学检查：培养细胞应呈现典型神经前体细胞形态

产品规格和使用说明

产品规格：通常以5×10⁵cells/T25培养瓶形式提供

运输方式：可选择冻存管干冰运输或培养瓶常温运输

接收处理：

冻存细胞：立即复苏或转入液氮保存

培养瓶：静置2-4小时后换液

注意事项：

仅限科研用途

建议在收到细胞后3天内反馈状态

定期拍照记录细胞生长情况

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