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产品信息

细胞简介：大鼠脉络膜微血管内皮细胞分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。

方法简介：实验室分离的大鼠脉络膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠脉络膜微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠脉络膜微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。
培养关键参数

培养基 含FBS、生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基

培养条件 气相：空气95% + CO₂ 5%，温度37℃

换液频率 每2-3天换液一次

传代特性 可传2-3代（不同来源显示2-3代或18代以上，可能因培养方法差异）

消化液 0.25%胰蛋白酶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

细胞的制备流程

组织取材：从活体动物或新鲜手术标本中获取目标组织，取材过程需严格无菌操作，尽量缩短组织暴露时间

组织处理：通过机械剪切、酶消化（常用胰蛋白酶、胶原酶）等方式将组织分散成单细胞悬液

细胞分离：利用过滤、离心等方法去除细胞碎片和杂质，获得纯化的单细胞群体

接种培养：将细胞接种到含特定培养基的培养容器中，置于37℃、5%CO₂的培养箱中培养

关键操作要点

细胞复苏

快速解冻：37℃水浴中摇晃冻存管至完全融化

离心洗涤：1000 RPM离心4分钟，弃上清后用培养基重悬

培养维护

贴壁细胞：汇合度达80%-90%时传代，使用胰酶消化（如0.25% Trypsin-EDTA）

悬浮细胞：定期换液，避免密度过高导致营养耗尽

冻存保护

冻存液配方：推荐10% DMSO + 90% 完全培养基，现用现配

程序降温：-80℃冰箱过夜后转入液氮长期保存

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