细胞简介

人外周血单个核细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中**提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。目前，主要的分离方法是密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离出不同的细胞。

方法简介：实验室分离的人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人外周血单个核细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形

传代特性：不增殖；不传代

消化液：0.25%胰蛋白酶人外周血单个核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的**培养状态。

分离与培养流程

组织处理：无菌获取组织后，用PBS清洗并剪碎至1mm³大小；

酶消化：胶原酶/胰酶混合消化（37℃, 10-20分钟），离心收集细胞悬液；

纯化：密度梯度离心或差速贴壁法去除杂细胞（如红细胞、成纤维细胞）；

接种培养：使用组织特异性培养基（如肝细胞专用培养基含生长因子），在37℃、5% CO₂条件下培养。

质量控制标准

纯度验证：免疫荧光检测细胞特异性标志物；

无菌检测：排除HIV-1、HBV、HCV、支原体等污染；

活力要求：复苏后存活率≥80%，贴壁率≥70%；

批次一致性：提供细胞计数、活力检测及功能验证报告（如代谢酶活性）。

运输与保存

运输形式：

冻存管（干冰运输，含冻存液：90%血清+10% DMSO）；

培养瓶（常温运输，培养基充满至瓶口）。

保存条件：

液氮（长期，≤-150℃）；

-80℃（短期，≤1个月）。

注：收到细胞需立即检查包装完整性并记录状态。
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