大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中丙二醛（MDA）的含量，适用于科研用途，不可用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被大鼠MDA捕获抗体，形成固相抗体；

加入样本或标准品，样本中的MDA与固相抗体结合；

加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物；

洗涤后加入TMB底物显色，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止后转为黄色；

450nm波长测定OD值，通过标准曲线计算MDA浓度。

样本处理

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清保存于-20℃（避免反复冻融）。

血浆：EDTA/肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），分离上清保存。

组织匀浆：按比例加入PBS匀浆，离心后取上清检测。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释原倍标准品。

加样：每孔加入样本或标准品10μl（避免孔壁接触），轻摇混匀。

温育：37℃孵育30分钟，封板膜覆盖。

洗涤：弃液后每孔加满洗涤液（30倍稀释），静置30秒弃去，重复5次，拍干。

加酶标试剂：每孔50μl（空白孔除外），37℃孵育30分钟。

显色：依次加入显色剂A、B各50μl，37℃避光显色15分钟。

终止：每孔加终止液50μl，立即测定OD值。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，使用前平衡至室温；

避免反复冻融标准品或样本；

严格控制温育时间和洗涤次数，避免交叉污染；

显色后颜色深浅与MDA浓度正相关，需在15分钟内完成检测。

计算与分析

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过回归方程计算样本MDA含量。
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