大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法。包被抗体与样本中的C3蛋白结合后，依次加入生物素化检测抗体和酶标记亲和素，形成复合物。通过TMB显色反应（450nm测OD值）定量C3浓度，标准曲线计算样本含量。

样本要求

类型：血清、血浆、细胞培养上清液。

处理：

血清/血浆：2000×g离心5分钟，-20℃保存，避免反复冻融。

其他生物样本：建议10000×g离心20分钟，-80℃保存。

操作步骤

标准品与样本准备：复溶标准品，样本浓度过高时需稀释（计算时乘以稀释倍数）。

加样与孵育：每孔加入标准品或样本，37℃孵育后洗涤。

抗体与酶反应：依次加入生物素化抗体、酶结合物，洗涤去除未结合物。

显色与终止：加入TMB底物显色（蓝色→黄色终止），450nm读数。

注意事项

每次实验需同步制作标准曲线，建议复孔检测。

样本OD值超过标准曲线最高值时需重新稀释检测。

避免试剂交叉污染，严格按说明书操作。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以实际试剂盒为准）。

灵敏度：<5 pg/mL。

特异性：与大鼠C3特异性结合，无交叉反应（需验证）。

保存与有效期

未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期6个月。

开封后：按组分要求分装保存（部分试剂需-20℃避光）。
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