产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆中的热休克因子1（HSF1）含量，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

检测范围

0.25–8 ng/mL（具体以实际标曲为准）。

试剂盒组成

| 组分名称 | 96T配置 | 48T配置 | 备注 |

| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 预包被抗大鼠HSF1抗体 |

| 标准品 | 0.3 mL×6管 | 0.3 mL×6管 | 浓度梯度已标定 |

| 样本稀释液 | 6 mL | 3 mL | 无蛋白缓冲液 |

| 检测抗体-HRP | 10 mL | 5 mL | 生物素标记 |

| 20×洗涤缓冲液 | 25 mL | 15 mL | 按说明书稀释使用 |

| 底物A/B | 各6 mL | 各3 mL | 避光保存 |

| 终止液 | 6 mL | 3 mL | 2M硫酸溶液 |

| 封板膜 | 2张 | 2张 | 一次性使用 |

| 说明书 | 1份 | 1份 | — |

操作步骤

样本准备

血清/血浆：3000 rpm离心10分钟（血浆需抗凝处理）。

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

保存：分装冻存于-20℃，避免反复冻融。

试剂平衡

使用前将所有组分室温平衡30分钟，洗涤液需溶解结晶（水浴加热）。

加样与温育

标准品/样本各50 μL加入对应孔，随后加50 μL检测抗体-HRP。

37℃孵育1小时，洗板3次（手工）或4次（洗板机）。

显色与终止

每孔加底物A/B各50 μL，37℃避光反应10分钟。

加入终止液50 μL，15分钟内测定OD450nm值。

结果计算

临界值 = 阴性对照OD均值 + 0.15。

阳性判定：样本OD值 > 临界值。

注意事项

不同批号试剂不可混用，避免底物B光照。

未用完板条需密封保存于2–8℃。

操作时需使用校准移液器，避免交叉污染。

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