| 订货号 | 纯度规格 | 包装 | 价格(元) |
| GOY-2658E | 48T | 盒 | 1200 |
| GOY-2658E | 96T | 盒 | 1800 |
| 型号: | GOY-2658E |
| 品牌: | 谷研 |
| 参考价格: | 1200 |
| 交货期: | 现货 |
| 产地: | 上海 |
| 产品别名: | 大鼠基质金属蛋白酶5ELISA试剂盒 Rat matrix metalloproteinase 5, MMP-5 Elisa Kit |
大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒
产品基本信息

检测原理:双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)
适应物种:大鼠
检测样本:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清
规格:48T/96T
储存条件:2-8℃避光保存
用途:科研实验专用
检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法:
特异性抗体预包被于酶标板,样本中的MMP-5与包被抗体结合。
依次加入生物素化检测抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,形成抗体-抗原-抗体复合物。
洗涤后加入显色底物TMB,在HRP催化下显蓝色,终止后变为黄色。
通过酶标仪测定450 nm波长处的吸光度(OD值),标准曲线计算样本浓度。
操作步骤

试剂准备
平衡:所有组分使用前需室温平衡20-30分钟。
标准品:按说明书梯度稀释(通常为0-500 pg/mL)。
加样与孵育
标准品孔:加入50μL不同浓度标准品。
样本孔:加入10μL待测样本+40μL稀释液(或直接加50μL,依说明书调整)。
空白孔:仅加样本稀释液。
每孔加入HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
洗涤
弃液后拍干,每孔加满洗涤液(PBS+0.05% Tween-20),重复洗板5次。
显色与终止
加底物A/B各50μL,避光孵育15分钟。
加入终止液50μL,颜色由蓝变黄。
检测
15分钟内于450nm读取OD值(校正波长630nm)。
数据分析
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线。
样本浓度通过曲线方程计算,复孔CV值应<10%。
操作注意事项

试剂平衡:从4℃取出后需室温平衡15-30分钟再使用;未用完板条应密封保存。
洗涤液处理:浓洗涤液若有结晶,可37℃水浴助溶,不影响检测效果。
加样规范:使用校准后的加样器,建议单次加样时间不超过5分钟;样本过多时可使用排枪。
标准曲线:每次检测需同步制作标准曲线,建议复孔检测。若样本OD值超出标准曲线范围,需用稀释液稀释后重新测定,最终浓度乘以稀释倍数。
避免污染:封板膜仅限单次使用;不同批号组分不可混用。
底物保存:需避光保存。
结果判定:严格按说明书操作,以酶标仪读数为准。
废弃物处理:所有实验废弃物需按生物危害物规范处置。
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