大鼠维生素E(VE)ELISA试剂盒

产品简介

本试剂盒采用竞争性酶联免疫吸附法（Competitive ELISA），可快速、灵敏地检测大鼠样本（血清、血浆、组织）中维生素E（α-生育酚）的含量。试剂盒包含预包被抗体和优化的反应体系，操作简便，适合科研实验室使用。

检测原理

预包被板：微孔板预包被抗维生素E单克隆抗体。

竞争反应：样本中的VE与加入的HRP标记VE竞争结合抗体位点。

显色反应：加入TMB底物，HRP催化产生蓝色产物（终止后变黄）。

定量分析：450nm波长下测定OD值，样本VE浓度与吸光度呈负相关。

试剂盒组成

（96T规格）

| 组分 | 规格 | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 96孔（12条×8孔） | 2-8℃ |

| 维生素E标准品 | 6管（0, 5, 10, 20, 40, 80 μg/mL） | -20℃ |

| HRP标记VE | 1瓶（0.5mL） | -20℃（避光） |

| 样本稀释液 | 1瓶（20mL） | 2-8℃ |

| 浓缩洗涤液（25×） | 1瓶（20mL） | 2-8℃ |

| TMB显色液 | 1瓶（12mL） | 2-8℃（避光） |

| 终止液 | 1瓶（12mL，2M H₂SO₄） | 2-8℃ |

| 封板膜 | 3张 | 室温 |

样本要求

| 样本类型 | 处理方式 |

| 血清/血浆 | EDTA抗凝，离心去除沉淀，-80℃冻存（避免反复冻融） |

| 组织匀浆 | 按质量比1:9加入PBS匀浆→离心取上清液 |

| 推荐稀释度 | 血清/血浆：1:5~1:10稀释；组织匀浆：按蛋白浓度调整 |

操作步骤

试剂准备：

洗涤液：20mL浓缩液 + 480mL双蒸水 → 混匀待用。

标准曲线：

用标准品/样本稀释液将标准品稀释至目标浓度。

加样反应（每孔）：

标准品/样本：50 μL → 加入HRP标记VE 50 μL → 37℃避光孵育30 min。

洗涤：弃液 → 洗涤液注满孔 → 静置30秒 → 甩干（重复5次）。

显色：加TMB底物90 μL → 37℃避光反应15 min。

终止与检测：加终止液50 μL → 即刻测量450nm处OD值（参考波长630nm）。

数据处理

计算标准品平均OD值 → 绘制Log浓度-OD值标准曲线（拟合R² > 0.99有效）。

代入样本OD值计算VE浓度：

样本浓度 (μg/mL) = 曲线计算值 × 稀释倍数

技术参数

| 项目 | 参数 |

| 检测范围 | 1.0 - 100 μg/mL |

| 灵敏度 | 0.5 μg/mL (最低检测限) |

| 精密度 | 批内变异CV < 10%；批间变异CV < 15% |

| 回收率 | 85-115%（参考血清加标实验） |

| 特异性 | 不与β-生育酚、生育三烯酚交叉反应 |

| 保存期 | 12个月（按指示保存） |

注意事项

所有试剂平衡至室温（25℃）后使用。

TMB显色液遇金属/氧化剂易失效，避免污染。

终止后30分钟内完成OD值读取。

高脂样本需离心去脂质干扰。
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