大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆或相关液体样本中血管紧张素Ⅰ转化酶（ACEⅠ）的浓度。通过预包被的捕获抗体与样本中ACEⅠ结合，经生物素标记抗体和酶复合物反应后显色，最终通过450nm波长测定吸光度（OD值），计算目标物浓度。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被大鼠ACEⅠ特异性捕获抗体。

样本孵育：加入样本或标准品，目标ACEⅠ与捕获抗体结合。

检测抗体：加入生物素标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。

酶联反应：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素结合。

显色与终止：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止液转化为黄色，OD值与ACEⅠ浓度成正比。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃保存时避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），取上清检测或冻存。

其他样本：组织匀浆需离心取上清，细胞培养液需去除颗粒物。

试剂盒组成

预包被微孔板

ACEⅠ标准品（浓度梯度）

生物素标记检测抗体

HRP标记链霉亲和素

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

说明书及标准曲线模板

操作步骤

标准品与样本加样：每孔加入标准品或样本100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复3次。

检测抗体孵育：每孔加生物素标记抗体50μL，37℃孵育30分钟，洗涤。

酶复合物反应：加HRP标记物50μL，37℃避光孵育30分钟，洗涤。

显色与检测：加TMB 90μL，37℃避光显色15分钟，终止后30分钟内测定OD450nm。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

不同批次试剂不可混用，标准品需现配现用。

显色时间需严格控制，终止后颜色稳定性约30分钟。

技术参数

检测范围：1.56–100 ng/mL（具体以标准曲线为准）

灵敏度：≤0.5 ng/mL

精密度：板内变异系数＜10%，板间＜15%

保存条件：4℃密封保存，有效期6个月
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