大鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中的组胺（HIS）含量。适用于科研用途，不用于临床诊断。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被大鼠组胺（HIS）特异性捕获抗体。

抗原结合：加入样本或标准品后，HIS与固相抗体结合。

酶标抗体：HRP标记的检测抗体与HIS形成复合物。

显色反应：TMB底物在HRP催化下显色（蓝色→黄色），吸光度（450 nm）与HIS浓度正相关。

试剂盒组成

48T/96T规格可选，主要成分包括：

预包被微孔板

组胺标准品（冻干或液体）

酶标试剂（HRP标记抗体）

显色剂A（TMB）、显色剂B（H₂O₂）

终止液（酸性溶液）

20×浓缩洗涤液（需稀释）

样本稀释液、封板膜、说明书

性能参数

灵敏度：最低检测限≤10 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他类似结构物质交叉反应。

重复性：板内/板间变异系数（CV）<15%。

样本处理

血清/血浆：采集后3000 rpm离心10分钟，避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：按质量体积比（如1:9）用PBS匀浆，离心取上清。

保存：短期（24小时）可存于2-8℃，长期需-20℃以下冻存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

加酶标试剂：每孔50 μL，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB避光反应15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

储存条件：2-8℃避光保存，复溶后标准品需分装冻存。

有效期：6个月（未开封）。

实验环境：避免强光、高温或污染。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合计算样本浓度。
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