人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒

产品概述

5-羟色胺（5-HT，血清素）是一种重要的单胺类神经递质，广泛参与情绪调节、睡眠、食欲和认知等功能。在科研中，检测其含量对于研究抑郁症、焦虑症及神经生理机制至关重要。

检测方法 竞争法 (Competitive ELISA) 或 双抗体夹心法

检测范围 通常为 15 pg/mL ～ 2400 pg/mL

灵敏度 最低检测限约 1.0 ～ 10 pg/mL

样本类型 血清、血浆 (EDTA/肝素)、组织匀浆、细胞培养上清、尿液等

检测原理

竞争法（主流）：

微孔板上包被有抗体。

样本中的5-HT与生物素标记的5-HT（或酶标抗原）竞争结合抗体。

结果解读：样本中5-HT浓度越高，结合上去的酶标物越少，颜色越浅（OD值与浓度呈负相关）。

双抗体夹心法：

微孔板上包被捕获抗体，加入样本后，再加入酶标检测抗体。

结果解读：颜色深浅与5-HT浓度呈正相关。

注意：使用前请务必确认试剂盒说明书上的原理，以免数据分析出错。

样本处理与要求

血清：全血在室温放置2小时或4℃过夜，离心（1000×g，20分钟）取上清。

血浆：使用EDTA或肝素作为抗凝剂，采集后30分钟内离心（1000×g，15分钟）取上清。

组织匀浆：用预冷的PBS冲洗组织，按1:9重量体积比加入PBS进行冰浴研磨，匀浆液需超声破碎或反复冻融后离心取上清。

保存：样本若不立即检测，应分装保存于 -20℃ 或 -80℃，避免反复冻融。

关键操作注意事项

抗凝剂选择：血浆样本推荐使用EDTA或肝素抗凝，避免使用可能干扰反应的抗凝剂。

试剂平衡：试剂盒从冰箱取出后，必须在室温（20-25℃）平衡 20-30分钟，且确保洗涤液中的结晶完全溶解。

洗板：洗板必须彻底。如果使用自动洗板机，建议加入30秒的浸泡步骤，以去除未结合的物质，降低背景。

显色：底物液（TMB）应在避光条件下使用。加入终止液后，颜色会由蓝变黄，需在15分钟内完成读数。

交叉反应：虽然特异性较好，但若样本中5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）或其他代谢物浓度过高，可能会产生轻微交叉反应，需在数据分析时予以考虑。

科研应用背景

5-HT含量的测定常用于：

神经精神疾病研究：抑郁症、焦虑症、精神分裂症的发病机制及药物疗效评估。

胃肠道功能研究：约90%的5-HT存在于肠道，参与调节胃肠蠕动。

心血管研究：研究5-HT对血管收缩及血小板聚集的影响。
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