人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。通过包被特异性抗体于酶标板，待测样本中的Col Ⅰ抗原与包被抗体结合，洗涤去除未结合成分后，依次加入生物素化检测抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。加入显色底物（TMB）后，在HRP催化下显蓝色，终止反应后转为黄色。通过酶标仪测定450 nm波长处的吸光度（OD值），Col Ⅰ浓度与OD值呈正相关，标准曲线计算样本浓度。

样本要求

血清：无菌无热原采血管收集全血，静置30分钟后3000 rpm离心10分钟分离血清。

血浆：EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：离心去除颗粒物（3000 rpm，10分钟）。

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清（3000 rpm，10分钟）。

保存：分装后-20℃冻存，避免反复冻融；检测前室温解冻并混匀。

试剂盒组成

预包被酶标板

Col Ⅰ标准品（浓度梯度）

生物素化抗体

HRP标记亲和素

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液，需稀释）

操作步骤

标准品与样本加样：每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液后加入洗涤液，静置30秒后弃去，重复3次。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体100 μL，37℃孵育1小时，洗涤。

加酶结合物：加入HRP标记亲和素100 μL，37℃孵育30分钟，洗涤。

显色：加入TMB底物100 μL，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液50 μL，立即测定450 nm OD值。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，有效期6个月；开封后请尽快使用。

避免底物接触强光或金属离子；终止液含酸性物质，需防护操作。

样本溶血或脂血可能干扰结果，建议重复测定。

技术参数

检测范围：0.5-200 ng/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：<0.1 ng/mL。

批内/批间变异系数：<10%。

应用范围

适用于人血清、血浆、细胞培养上清及组织匀浆中Col Ⅰ的定量检测，广泛应用于纤维化研究、骨代谢及创伤修复等领域。
公司正在出售的产品