产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他相关生物液体中大肠癌专一抗原4（CCSA-4）的含量。试剂盒仅供体外研究使用，不适用于临床诊断。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被纯化的抗CCSA-4抗体，形成固相载体。

抗原结合：加入待测样本或标准品，样本中的CCSA-4与固相抗体结合。

生物素化抗体结合：加入生物素标记的抗CCSA-4抗体，形成“抗体-抗原-生物素化抗体”复合物。

酶标记物反应：加入HRP标记的亲和素，与生物素结合。

显色与终止：加入底物TMB，在过氧化物酶催化下显蓝色，酸性终止液终止反应后转为黄色。

定量分析：通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），OD值与CCSA-4浓度呈正相关，标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

酶联板：96孔或48孔（规格可选）。

标准品：冻干粉2瓶，临用前稀释至50 ng/ml，梯度稀释范围为0.78–50 ng/ml。

生物素化抗体、HRP标记亲和素、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液等。

样本要求

样本类型：血清、血浆、尿液、细胞培养上清液或组织匀浆。

处理建议：避免反复冻融，离心去除颗粒物，2–8℃短期保存或-20℃长期保存。

操作步骤

标准品稀释：临用前15分钟内配制标准曲线浓度梯度。

加样与孵育：依次加入样本、标准品、生物素化抗体、酶结合物，37℃避光孵育。

洗涤：彻底洗涤未结合物质。

显色与终止：加入TMB显色后终止反应。

检测：450 nm波长下读取OD值，计算浓度。

性能参数

检测范围：0.78–50 ng/ml（具体范围可能因批次调整）。

灵敏度：最低检测浓度≤0.1 ng/ml。

精密度：批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15%。

注意事项

避免试剂接触皮肤或黏膜，操作时需佩戴防护用具。

不同批次试剂组分不可混用。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

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