人白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒

产品基本信息

| 项目 | 内容描述 |

| 检测物质 | 人白三烯 C4 (Leukotriene C4, LTC4) |

| 检测原理 | 竞争性酶联免疫吸附法（Competitive ELISA） |

| 样本类型 | 血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆液（需预处理） |

| 检测范围 | 典型范围：15.6–1000 pg/mL（有差异） |

| 灵敏度 | ≤ 5 pg/mL（最低检测限） |

| 反应时间 | 孵育总时长约 3-4 小时（具体操作依说明书） |

| 试剂盒组分 | 预包被板、LTC4 标准品、检测抗体、HRP 标记链霉亲和素、显色液、终止液等 |

| 保存条件 | 2–8℃ 冷藏（避免冻存）；部分组分需 -20℃ 保存（如标准品） |

操作步骤

样本前处理

血清/血浆：采集后 30 分钟内离心（1000×g, 15min），-80℃ 分装保存；避免反复冻融。

细胞上清：离心去除杂质，直接检测或冻存。

组织匀浆：按比例加入 PBS 匀浆，离心取上清（建议加蛋白酶抑制剂）。

检测流程

加样：标准品/样本 → 预包被板孔。

孵育：加入生物素化抗体，37℃ 避光孵育 1 小时。

洗涤：洗板 3–4 次。

酶结合：加 HRP-链霉亲和素，37℃ 孵育 30 分钟。

显色：加 TMB 底物 → 避光反应 15 分钟。

终止：加终止液（2N H₂SO₄）。

读数：450 nm 波长测 OD 值（参考 540/570 nm 校正）。

关键注意事项

样本稳定性

LTC4 易降解！采样后需立即置冰上处理，建议加入：

环氧合酶抑制剂（如 Indomethacin, 1 μM）

谷胱甘肽转移酶抑制剂（可选，避免体外转化）

交叉反应

可能与其他白三烯（LTD4, LTE4）存在交叉反应（＜10%），需确认抗体特异性。

干扰物质

避免使用含 NaN₃ 的缓冲液（影响 HRP 活性）；溶血、脂血样本需额外处理。

结果计算与判读

标准曲线：以 LTC4 标准品浓度（pg/mL）为横坐标，对应 OD 值/B0（最大结合率）为纵坐标，拟合 4-PL 或 log-log 曲线。

样本浓度：根据 OD 值从曲线反推浓度（单位：pg/mL），高于检测范围需稀释复测。
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