人白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆或其他生物样本中白细胞弹性蛋白酶（HLE）的浓度。试剂盒包含预包被抗体的微孔板、标准品、检测抗体、显色底物及配套缓冲液，操作便捷，灵敏度高，特异性强。

检测原理

固相包被：微孔板预包被HLE特异性抗体，形成固相抗体。

样本反应：加入待测样本或标准品，HLE与固相抗体结合。

酶标抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下显蓝色，终止液（酸）作用后转为黄色，其吸光度（OD值）与样本中HLE浓度成正比。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释原倍标准品（如0、12.5、25、50、100、200 ng/mL）。

加样：

空白孔：仅加缓冲液。

标准孔：加入50 μL标准品。

样本孔：先加40 μL稀释液，再加10 μL样本（终稀释度5倍）。

温育：37℃孵育30分钟，洗板5次。

酶标抗体孵育：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟，洗板。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后立即测定450 nm OD值。

注意事项

样本处理：

避免反复冻融，推荐分装保存于-20℃以下。

浑浊样本需离心（3000 rpm, 10分钟）后取上清检测。

实验控制：

标准品及样本建议做双复孔，取平均值以减少误差。

显色过浅可延长底物孵育时间（不超过30分钟）。

试剂保存：

未开封试剂盒需2~8℃保存，有效期6个月；开封后微孔板需密封干燥保存。

干扰因素：

细菌污染可能导致假阳性；溶血或高脂样本需预处理。

技术参数

检测范围：12.5–200 ng/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：<5 ng/mL。

批内/批间差：CV<10%。

规格：48T或96T微孔板。

适用范围

仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
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