产品简介

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA），用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中**胆碱磷酸甘油酯（PC/CPG）**的含量。磷脂酰胆碱是细胞膜主要成分，其异常表达与肝脏疾病、动脉粥样硬化及神经系统病变相关。

检测原理

包被：抗PC抗体预包被于酶标板。

结合：样本中的PC/CPG与固相抗体结合。

标记：加入生物素化抗PC抗体形成复合物。

显色：辣根过氧化物酶（HRP）标记链霉亲和素催化TMB底物显蓝色。

定量：终止液转为黄色后，在450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与PC浓度成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 规格（96T） | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 12×8孔 | 2-8℃ |

| PC标准品 | 6支（0, 5, 10, 20, 50, 100 ng/mL） | -20℃ |

| 生物素化检测抗体 | 1瓶（120 μL） | -20℃ |

| HRP酶结合物 | 1瓶（120 μL） | 2-8℃ |

| TMB显色液 | 1瓶（10 mL） | 避光2-8℃ |

| 终止液 | 1瓶（10 mL） | 室温 |

| 洗液（20×） | 25 mL（稀释至500 mL） | 室温 |

| 封板膜 | 3张 | 室温 |

样本要求

血清/血浆：EDTA抗凝，避免溶血，离心后取上清，-80℃保存（避免反复冻融）。

细胞上清：离心去除碎片，立即检测或-80℃保存。

组织匀浆：PBS匀浆后离心取上清。

建议稀释倍数：10-100倍（根据预实验调整）。

操作步骤

标准品稀释：梯度稀释标准品。

加样：标准品/样本各100 μL加入对应孔（复孔设计），37℃孵育90 min。

洗涤：1×洗液洗板3次。

加检测抗体：加生物素化抗体100 μL，37℃孵育60 min，洗板。

加酶结合物：加HRP结合物100 μL，37℃避光孵育30 min，洗板。

显色：加TMB 90 μL，37℃避光反应15 min。

终止：加终止液50 μL，立即测量450 nm吸光度。

结果计算

绘制标准曲线：标准品浓度（X）vs. OD值（Y）。

拟合4参数曲线（推荐）或双对数曲线。

样本浓度从曲线反推，乘以稀释倍数。

线性范围：2-100 ng/mL | 最低检测限（LOD）：0.5 ng/mL

性能参数

精密度：板内变异系数（CV）<8%，板间CV<10%。

回收率：85-115%（人血清样本验证）。

特异性：与磷脂酰乙醇胺（PE）、鞘磷脂（SM）交叉反应<0.1%。

注意事项

所有试剂使用前平衡至室温（25±2℃）。

洗液需用去离子水精确稀释。

避免TMB接触金属；终止后30 min内读数。

不同批次不可混用组分。

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