预期用途

本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或组织匀浆液中总蛋白激酶C (Total PKC) 或 的含量。本产品适用于科学研究用途。

主要原理

本试剂盒采用 [双抗体夹心法 / 竞争法] (以双抗体夹心法为例进行说明)：

预包被： 微孔板孔内预包被有抗人PKC的单克隆抗体 (捕获抗体)。

加样孵育： 将含有PKC的标准品、待测样本或质控品加入相应孔中。样本中的PKC分子会被孔内固定的捕获抗体特异性地捕获。

洗板： 移除未结合的物质。

加检测抗体： 加入辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗人PKC多克隆抗体或单克隆抗体 (检测抗体)，形成“捕获抗体-PKC-酶标检测抗体”的夹心复合物。

洗板： 再次移除未结合的物质，特别是未结合的酶标抗体。

加底物显色： 加入显色底物溶液 (如TMB)。在HRP酶的催化下，底物发生颜色反应，生成蓝色产物。

终止反应： 加入终止液 (如硫酸溶液)，使颜色反应停止，蓝色转为黄色。

测定吸光度： 使用酶标仪在450nm波长处读取各孔的吸光度 (OD值)。颜色的深浅与样本中PKC的浓度成正比。

计算浓度： 绘制标准曲线 (标准品浓度vs. OD值)，通过待测样本的OD值，即可计算出样本中PKC的浓度。

注意事项

仅供研究使用 (For Research Use Only - RUO)：不得用于诊断或治疗目的。

有效期：所有组分必须在标示的有效期内使用。

贮存条件：严格按照说明书要求储存（通常标准品、检测抗体、酶结合物、质控品需-20℃储存，其他组分2-8℃储存）。避免反复冻融。避免暴露在强光和高温下。

安全防护：

操作时请务必穿戴实验服、手套和防护眼镜。

终止液为强酸溶液，有腐蚀性，避免接触皮肤和眼睛。若不慎接触，立即用大量清水冲洗，必要时就医。

TMB底物可能有轻微毒性，避免接触皮肤和黏膜。

所有与血液、体液或组织样本接触的材料均视为生物危险品。按照当地生物安全法规处理所有废物。

请勿用嘴吸取任何试剂。

样本处理

避免反复冻融样本，以减少蛋白降解。

溶血、脂血或重度黄疸的样本可能干扰检测结果。

处理血浆样本时，避免使用含EDTA的采血管（因其会螯合钙离子，而钙离子是某些PKC亚型激活所需），建议使用肝素钠或柠檬酸盐抗凝管，[若为检测特定亚型请查阅具体试剂盒要求]。

组织匀浆或细胞裂解物中可能含有干扰物质，应进行适当稀释并离心去除沉淀。

实验环境：保持室温（RT）稳定（通常在18-25℃之间）。试剂和样品在操作前应在室温下平衡30分钟。

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