人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒

预期用途

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA），定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液样本中的人表面膜免疫球蛋白A (mIgA) 的含量。

本试剂盒仅可用于科研用途，不得用于临床诊断。

检测原理

包被抗体： 微孔板预包被了高亲和力的抗人mIgA单克隆抗体。

样本结合： 将标准品或稀释后的待测样本加入孔中，样本中的mIgA与包被抗体结合。

洗涤： 洗去未结合的物质。

检测抗体结合： 加入生物素标记的抗人mIgA检测抗体，它与样本中已捕获的mIgA结合，形成抗体-抗原-检测抗体复合物。

二次洗涤： 洗去多余的检测抗体。

酶结合物结合： 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素（Streptavidin）。链霉亲和素与检测抗体上的生物素发生高亲和力结合。

三次洗涤： 洗去未结合的酶结合物。

显色反应： 加入底物TMB（或ABTS等）。结合在复合物上的HRP催化无色的TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）转化为蓝色产物。

终止反应： 加入终止液（通常是酸溶液），使反应停止，颜色由蓝色变为黄色。

读数： 使用酶标仪在450nm（若使用TMB，主波长450nm，参考波长630nm或570nm）读取每孔的光密度（OD）值。

定量分析： 根据标准品浓度与对应的OD值绘制标准曲线（通常为4参数或对数-对数回归曲线）。待测样本中mIgA的浓度可通过其OD值在标准曲线上插值计算得出。

材料自备

酶标仪 (450nm ±10nm 或按说明书要求波长)。

可调节量程的单道、多道移液器及吸头。

合适的稀释用试管。

盛放洗涤缓冲液的水槽（或洗板机）。

蒸馏水或去离子水（用于稀释洗涤液）。

一次性手套、实验服、护目镜（操作终止液时必备）。

计时器。

吸水纸或离心机（用于拍干或离心甩干洗板后的板子）。

储存条件

未开启试剂盒： -20°C 避光保存，避免反复冻融。

解冻后：

预包被板：一般可短期（如1周）置于含干燥剂的密封袋中存放于2-8°C，但建议尽快使用。长期仍需-20°C。

标准品、检测抗体、链霉亲和素-HRP：稀释后稳定性差，应现配现用。浓缩液分装-20°C保存，避免反复冻融。

稀释后的洗涤液、样品/标准品稀释液、检测抗体稀释液、SA-HRP稀释液：通常2-8°C可保存数天至一周。

TMB底物：避光（锡纸包裹或棕色瓶），2-8°C保存。应无色或微蓝色（若变蓝表明失效）。

终止液：室温或2-8°C保存。
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