人补体7(C7)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的补体C7蛋白浓度。

检测原理： 预包被抗人C7特异性抗体捕获样本中的C7蛋白，加入生物素标记的检测抗体形成夹心复合物，再通过链霉亲和素-HRP催化TMB显色反应，颜色深浅与C7浓度成正比。

技术参数

| 项目 | 参数说明 |

| 检测范围 | 0.156 - 10 ng/mL |

| 灵敏度(LOD) | ≤0.05 ng/mL |

| 样本类型 | 血清、血浆(肝素/EDTA/柠檬酸盐)、细胞上清 |

| 样本用量 | 100 μL/孔 |

| 检测时间 | 4.5小时（标准流程） |

| 种属交叉性 | 人特异性，无显著其他物种交叉 |

| 精密度(CV) | 板内＜8%，板间＜10% |

试剂盒组分（96孔装）

| 组分名称 | 数量 | 保存条件 |

| 预包被抗人C7微孔板 | 1块 (96孔) | 2-8°C |

| 人C7标准品(冻干粉) | 2管 | -20°C |

| 生物素标记检测抗体(100x) | 120 μL | -20°C |

| 链霉亲和素-HRP(100x) | 120 μL | -20°C |

| TMB显色液 | 10 mL | 避光2-8°C |

| 终止液(2M H₂SO₄) | 10 mL | 室温 |

| 洗涤缓冲液(25x) | 30 mL | 室温 |

| 样本稀释液 | 20 mL | 2-8°C |

| 封板膜 | 4张 | 室温 |

样本处理指南

血清/血浆： 采集后2小时内离心(1000×g, 15min)，避免溶血。分装后-80°C保存，避免反复冻融。

稀释要求： 推荐用样本稀释液按1:100初步稀释（实际比例需预实验优化）。

操作流程

标准品重建： 用1mL样本稀释液溶解标准品，配成10ng/mL母液，梯度稀释成7个浓度点。

加样： 加标准品/样本各100μL至对应孔，37°C孵育2h。

检测抗体： 洗板3次，加生物素化抗体工作液100μL，37°C孵育1h。

酶结合物： 洗板3次，加链霉亲和素-HRP工作液100μL，37°C孵育30min。

显色： 洗板5次，加TMB底物90μL，避光37°C显色15min。

终止&读数： 加终止液50μL，450nm波长下立即读OD值。

每次实验需设空白孔(仅加试剂)与复孔！

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD450值为纵坐标拟合4PL曲线。

根据样本OD值计算C7浓度（稀释样本需乘以稀释倍数）。
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