检测原理

采用竞争性ELISA法：样本中的rT3与预包被的rT3抗原竞争结合限量的酶标抗体，通过显色反应强度反推样本中rT3浓度（吸光度值与浓度成反比）。

试剂盒组分

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 预包被rT3微孔板 | 96孔 | 1块 |

| rT3标准品 | 0, 0.15, 0.5, 1, 2, 4 ng/mL | 6管×1mL |

| 酶标抗体 | HRP标记抗-rT3 | 1瓶×12mL |

| TMB显色液 | 3,3',5,5'-四甲基联苯胺 | 1瓶×10mL |

| 终止液 | 2M H₂SO₄ | 1瓶×10mL |

| 洗涤缓冲液（20×） | PBS-Tween 20 | 1瓶×50mL |

操作步骤

样品准备：

血清/血浆离心去除杂质，避免反复冻融。

加样：

每孔加50μL标准品或样本 → 加50μL酶标抗体 → 37℃孵育60分钟。

洗涤：

甩干板内液体 → 用1×洗涤液洗板5次。

显色：

每孔加100μL TMB → 避光室温反应15分钟。

终止：

每孔加50μL终止液，10分钟内读板（波长450nm）。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度（X轴）vs吸光度值（Y轴）拟合4参数曲线。

根据样本OD值代入曲线计算浓度。

性能参数

| 指标 | 数值 |

| 检测范围 | 0.15–4 ng/mL |

| 最低检出限 | 0.08 ng/mL |

| 批内精密度 | CV ≤ 8% |

| 批间精密度 | CV ≤ 12% |

| 回收率 | 85%~115% |

注意事项

样本处理：

避免使用溶血、脂血或反复冻融样本。

干扰物：

高浓度胆红素（>20 mg/dL）或甘油三酯（>500 mg/dL）可能影响结果。

实验质控：

每块板必须包含空白孔、标准曲线孔。

临床意义

rT3作为甲状腺功能代谢标志物：

升高：见于非甲状腺疾病综合征（NTI）、硒缺乏、皮质醇增多症等；

降低：可能与Graves病或甲状腺功能亢进相关。

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