人补体片断3b(C3b)ELISA试剂盒

产品基本信息

检测目标：人补体片段3b（C3b）

适用样本：血清、血浆、尿液、脑脊液、胸腹水、细胞培养上清液、组织匀浆等。

检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。

规格：48T/96T（可根据需求选择）。

灵敏度：检测范围通常为20–640 μg/L（具体以实际试剂盒标注为准）。

试剂盒组成

预包被微孔板：抗人C3b抗体包被的96孔板。

标准品：系列浓度C3b标准品（冻干或液体形式）。

检测抗体：HRP标记的抗C3b抗体。

洗涤液：浓缩缓冲液（使用前需稀释）。

底物溶液：TMB或其他显色底物。

终止液：硫酸溶液（2M）。

封板膜：用于孵育时密封微孔板。

操作步骤

样本准备：

血清/血浆需离心去除颗粒，避免反复冻融（建议分装保存于-20℃）。

组织匀浆需充分裂解后离心取上清。

标准品稀释：按说明书梯度稀释，建议做双复孔。

加样与孵育：

每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1–2小时。

洗涤3次后加入检测抗体，孵育30–60分钟。

显色与终止：

加入TMB底物，避光显色10–15分钟（显色时间可调整）。

终止后30分钟内测定OD450 nm值。

注意事项

保存条件：

未开封试剂盒保存于-20℃（长期）或2–8℃（短期使用）。

洗涤液盐析时需37℃水浴助溶。

实验控制：

每批实验需包含空白孔、标准曲线孔和质控样本。

显色过浅可延长孵育时间，过深需缩短。

干扰因素：

溶血、脂血或细菌污染样本可能导致假阳性。

避免使用叠氮钠（HRP抑制剂）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合计算样本浓度。
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