人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量或定性检测人血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞培养上清等样本中的补体片段5b(C5b)含量。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），灵敏度高，特异性强，操作便捷。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔

标准品：冻干粉或液体形式，需按说明书复溶

检测抗体：生物素标记的抗C5b抗体

酶结合物：辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素

显色液（A/B液）：TMB底物系统（避光保存）

终止液：硫酸溶液（2 mol/L）

洗涤缓冲液：浓缩液，需按比例稀释

说明书及质检报告

操作步骤

样本准备：

血清/血浆需离心去除颗粒物，其他液体样本需预处理（如稀释或离心）。

标准品梯度稀释（建议设置6-8个浓度点）。

加样与孵育：

每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1-2小时。

洗涤3次（每次300 μL洗涤液）。

检测抗体孵育：

加入生物素化抗体100 μL，37℃孵育1小时，再次洗涤。

酶结合物反应：

加入HRP标记的链霉亲和素100 μL，37℃避光孵育30分钟，洗涤3次。

显色与终止：

加入TMB显色液（A液与B液等体积混合）100 μL，室温避光反应15-30分钟。

加入终止液50 μL，立即于450 nm波长读取吸光度（参考波长630 nm校正）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

通过曲线方程计算样本中C5b浓度。

注意事项

保存条件：

未开封试剂盒需-20℃保存；开封后微孔板及部分试剂可短期存放于2-8℃。

避免反复冻融标准品或酶结合物。

实验要求：

使用前所有试剂需平衡至室温。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

质量控制：

每批次实验需包含空白孔、阴性对照及阳性对照。

若样本OD值超出标准曲线范围，需适当稀释后重测。
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