人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒

产品基本信息

用途：科研实验，定量检测人血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清等样本中的iFABP含量。

检测范围：78 pg/mL–5000 pg/mL。

最低检测限：≤19.5 pg/mL。

有效期：6个月（未开封，-20℃保存；频繁使用时需2-8℃冷藏）。

实验原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被纯化的人iFABP捕获抗体。

加入样本后，样本中的iFABP与固相抗体结合。

加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

洗涤后加入TMB底物显色，颜色深浅与iFABP浓度正相关。

终止反应后，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（冻干或液体）

生物素化抗体、HRP标记抗体

浓缩洗涤液（需1:20稀释）

TMB显色液（A/B液需1:1混合）

终止液

样本稀释液

样本处理

血清/血浆：使用无热原、无内毒素抗凝管（EDTA/肝素/柠檬酸盐），避免溶血或高血脂样本。离心去除悬浮物，-20℃保存（避免反复冻融）。

组织匀浆：按标准方法制备后离心取上清。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释（如1:2至1:64），空白孔加稀释液。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复3次。

加检测抗体：加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB混合液，避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液，30分钟内测定OD450值。

注意事项

浓缩洗涤液低温可能析出盐结晶，需37℃水浴助溶后稀释。

若样本浓度超出标准曲线范围，需稀释后复测。

不同批次试剂不可混用，开封后酶联板需密封防潮。

实验废弃物需按生物危害规范处理。

质量控制

标准曲线R²应≥0.99。

复孔CV值需＜15%。
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