产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，用于定量检测人血清、血浆或组织匀浆中的肺炎支原体抗体（MP-Ab）。通过生物素-亲和素系统放大信号，结合HRP酶催化底物显色，颜色深度与样本中MP-Ab浓度呈正相关。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔或48孔配置（含可拆卸板条），密封保存于2-8℃。

标准品：400 ng/mL（冻干或液体），使用时按说明书稀释。

检测抗体：HRP标记的MP-Ab抗体（100μL/管）。

底物溶液：TMB（A/B液各50μL/孔）。

终止液：2M硫酸（50μL/孔）。

洗涤缓冲液：30×浓缩液，需稀释后使用。

封板膜：一次性使用。

操作步骤

样本准备：

血清/血浆需离心去除颗粒，组织匀浆需充分裂解后离心取上清。

样本稀释：按1:5比例用配套稀释液处理（如10μL样本加40μL稀释液）。

加样与孵育：

标准品孔：加入梯度稀释的标准品50μL。

样本孔：先加10μL样本，再加40μL稀释液。

每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：

弃液后拍干，每孔加满洗涤液，静置1分钟，重复5次。

显色与终止：

每孔加底物A/B各50μL，37℃避光反应15分钟。

加入终止液50μL，15分钟内测定450nm吸光度（OD值）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线。

样本浓度通过标准曲线计算，若稀释需乘以稀释倍数（如5倍）。

注意事项

储存条件：试剂盒2-8℃保存，避免反复冻融；底物需避光。

操作规范：

使用前所有组分需平衡至室温。

避免交叉污染，更换枪头。

质量控制：

空白孔（仅加稀释液）OD值应＜0.1。

标准曲线R²需≥0.99。

技术参数

检测范围：0.1-400 ng/mL。

灵敏度：0.1 ng/mL。

特异性：与人其他同源蛋白无交叉反应。

适用样本：血清、血浆、组织匀浆。

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