产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法或双抗原夹心法（依据差异）酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中的碱性胎儿蛋白（BFP）含量。适用于科研用途，不适用于临床诊断。

检测原理

夹心法原理：

预包被抗BFP抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

洗涤后加入底物TMB显色，终止反应后测定450 nm波长下的吸光度（OD值），OD值与BFP浓度呈正相关。

双抗原夹心法：

包被纯化抗原的微孔板与样本中BFP及HRP标记抗原结合，形成“抗原-抗体-酶标抗原”复合物，显色后定量。

试剂盒组成

| 组分 | 规格（96T/48T） | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1块/半块 | 2-8℃ |

| BFP标准品 | 400 ng/ml（按需稀释） | 2-8℃ |

| HRP标记抗体/抗原 | 6 ml/3 ml | 2-8℃ |

| 底物（TMB A/B） | 各6 ml/3 ml | 避光 |

| 终止液 | 6 ml/3 ml | 室温 |

| 洗涤缓冲液（浓缩） | 20 ml/10 ml | 2-8℃ |

注：不同组分可能存在差异，具体以实际货号说明书为准。

样本处理

血清/血浆：采集后3000 rpm离心10分钟，避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：按1:9比例加入PBS匀浆后离心取上清。

保存：短期（24小时）可置于2-8℃，长期需-20℃以下冻存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至工作浓度。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品50 μl，37℃孵育30-60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

显色与终止：加入TMB底物避光反应15分钟，终止液终止后30分钟内检测。

注意事项

储存：未开封试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；开封后需密封防潮。

操作：

避免底物接触金属器械或强光。

不同批号组分不可混用。

安全：佩戴防护用具，避免直接接触终止液或底物。

技术参数

检测范围：通常为1.56-100 ng/ml（具体因而异）。

灵敏度：≤0.1 ng/ml。

精密度：板内/板间CV均<10%。

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