人高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法：

预包被抗人高铁血红蛋白抗体于微孔板中；

样本中的高铁血红蛋白与包被抗体结合；

加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物；

加入TMB底物显色，颜色深浅与样本中MHB浓度成正比，450nm波长测定OD值，计算浓度。

检测方法: 双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA）

适用样本: 人血清、血浆、全血裂解液、细胞上清液

保存条件: 2-8℃避光保存（详见组分标签）

有效期: 12个月

试剂盒组分

| 组分 | 规格（96T） | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 12条×8孔 | 2-8℃ |

| MHB标准品 | 6管（0-100 ng/mL）| -20℃ |

| HRP标记检测抗体 | 1瓶（10mL） | -20℃ |

| TMB显色底物A/B液 | 各1瓶（12mL） | 2-8℃（避光） |

| 洗涤缓冲液（20×） | 1瓶（50mL） | 2-8℃ |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶（15mL） | 室温 |

| 封板膜 | 4张 | 室温 |

样本处理

血清/血浆：2500 rpm离心10分钟，避免溶血，-80℃长期保存。

全血裂解液：取抗凝全血，加入4倍体积冷蒸馏水裂解红细胞，离心后取上清检测。

样本稀释：建议预实验确定稀释倍数，常规血清样本稀释1:10~1:50。

操作步骤

试剂准备：20×洗涤液→1×工作液（去离子水稀释）。

加样：

标准品孔：加入梯度浓度标准品（0、10、20、50、80、100 ng/mL）100 μL；

样本孔：加入稀释样本100 μL；

空白孔：仅加稀释液。

温育：37℃孵育60分钟，洗板5次。

加检测抗体：每孔加酶标抗体100 μL，37℃孵育30分钟，洗板5次。

显色：每孔加TMB A/B液各50 μL，避光反应20分钟。

终止：每孔加终止液50 μL。

读值：450nm波长酶标仪测定OD值（30分钟内完成）。

结果计算

绘制标准曲线：标准品浓度（X）vs OD值（Y），拟合线性回归方程。

样本MHB浓度 =（样本OD值 - 空白OD值）× 稀释倍数 / 曲线斜率。

关键参数

| 性能指标 | 参数值（示例） |

| 检测范围 | 2-150 ng/mL |

| 最低检测限 | 0.5 ng/mL |

| 批内变异系数 | < 8% |

| 批间变异系数 | < 10% |

| 回收率 | 85%-115% |

| 特异性 | 不与人Hb、肌红蛋白交叉反应 |

注意事项

避免反复冻融试剂；

不同批次试剂勿混用；

TMB底物避光保存；

实验过程使用一次性吸头，穿防护服；

终止液具强腐蚀性，妥善处理废液。
公司正在出售的产品