人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）原理，用于定量检测人样本中BMP-7的活性浓度。通过生物素-亲和素系统放大信号，确保检测的高灵敏度和特异性。

检测原理

抗原抗体结合：样本中的BMP-7与预包被抗体及生物素标记的检测抗体形成复合物。

酶标记反应：加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（HRP），与生物素结合。

显色反应：加入底物TMB（A/B液）后，HRP催化显色，颜色深浅与BMP-7浓度成正比，通过酶标仪测定吸光度（OD值）计算浓度。

试剂盒组成

微孔板：预包被抗体的96孔或48孔板（根据配置选择）。

标准品：400 ng/mL BMP-7冻干粉或溶液（需按说明书复溶稀释）。

检测抗体：生物素标记的抗BMP-7抗体。

酶结合物：亲和素-HRP复合物。

洗涤缓冲液：20×浓缩液，需稀释后使用。

底物（TMB A/B）：显色反应液。

终止液：2M硫酸溶液。

封板膜：用于孵育时密封微孔板。

样本要求

适用样本：血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液。

样本处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃保存（长期保存建议-80℃）。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释（建议范围：0.5–400 ng/mL）。

加样与孵育：每孔加入标准品或样本，37℃孵育1–2小时。

洗涤：用洗液清洗未结合物质（3次）。

酶标抗体孵育：加入HRP标记物，37℃孵育30–60分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，终止后30分钟内测定OD450 nm。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

试剂盒需2–8℃保存，避免冻融或长时间室温暴露。

不同批次试剂不可混用。

操作时需佩戴防护用具，终止液为强酸，避免接触皮肤。

技术参数

检测范围：1.56–100 ng/mL（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：<0.5 ng/mL。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。
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