判断SUMO2 ELISA试剂盒是否准确，关键看这三步：‌标准曲线、质控样本和重复性验证‌。具体操作如下：

一、标准曲线验证

‌R²值‌：标准曲线R²值应≥0.99，若低于0.97，提示抗体亲和力下降或标准品稀释错误。

‌最高浓度孔OD值‌：应≥1.0，若<1.0，说明检测灵敏度下降，试剂盒失效。

‌空白孔OD值‌：应≤0.2，若>0.2，可能因非特异性结合或酶标抗体污染。

二、质控样本验证

‌阳性对照‌：使用试剂盒自带或已知浓度的SUMO2标准品，其OD值应呈明显浓度梯度，且最高浓度孔显色最深。

‌阴性对照‌：使用健康人血清或稀释液，OD值应显著低于cut-off值(通常为NC均值+2SD)。

‌加标回收率‌：向样本中加入已知浓度SUMO2标准品，回收率应在80%–120%。

三、重复性验证

‌批内变异系数(CV%)‌：同一试剂盒不同孔之间的OD值CV%应≤20%，若>20%，提示加样误差大、板间污染或试剂不均。

‌批间一致性‌：不同批次试剂盒检测同一标准品，结果应一致。

四、操作注意事项

‌温度平衡‌：试剂从冰箱取出后，室温平衡15-30分钟再使用。

‌加样器校准‌：确保加样量准确，避免试验误差。

‌封板膜使用‌：仅限一次性使用，避免交叉污染。

‌双孔实验‌：建议做双孔实验，保证数据准确性。

五、失效处理

‌立即停用‌：任一指标不合格，停止使用该试剂盒。

‌记录异常‌：保存原始OD值、标准曲线图、质控数据。

‌联系供应商‌：提供实验数据，申请更换或技术支持。