PCR实验极易受扩增产物气溶胶污染,必须严格执行物理隔离:
四区独立:设立试剂配制区、样本处理区、扩增区和产物分析区,各区域专用设备、耗材与防护服,禁止交叉使用。
单向流程:人员与物品流动应遵循“试剂→样本→扩增→分析”单向路径,避免回流。
环境清洁:
每日紫外线照射30分钟以上;
工作台面用10%次氯酸钠或75%乙醇擦拭;
移液器定期用DNA去除剂(如DNA AWAY)处理。
操作细节:
使用带滤芯吸头,防止喷溅;
所有试剂分装使用,避免反复冻融和交叉污染;
扩增结束后,反应管必须密封丢弃,禁止开盖,防止气溶胶释放。
此外,实验人员的行为规范同样不可忽视。所有操作者进入不同区域前需进行严格的手部消毒,并在缓冲间更换对应颜色的专用防护服,不同区域服装以显色标识区分。