分光光度计是一种常用的实验室分析仪器,可满足各种应用的要求,可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、 环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域。
在选择分光光度计检测条件时应注意:
一、入射光波长的选择
在大吸收波长处测定吸光度不仅能获得高的灵敏度,而且还能减少由非单色光引起的对朗伯-比尔定律的偏离。因此在分光光度计的分光光度法测定中一般选择大吸收波长为入射波长。
二、参比溶液的选择
在实验中,要选择合适的空白溶液作为参比溶液来调节分光光度计的零点,以便消除显色溶液中其他有色物质的干扰,抵消吸收池和试剂对入射光的影响。根据试样溶液的性质,选择合适组分的参比溶液很重要。
三、吸光度范围选择与控制
任何分光光度计都有一定的测量误差,测量误差的来源主要是光源的发光强度不稳定法,光电效应的非线性,电位计的非线性,杂散光的影响,单色器的光不纯等因素,对于一台固定的分光光度计来说,以上因素都是固定的,也就是说它的误差具有一定稳定性。
四、比色皿的使用
选择适宜规格的比色皿,尽量把吸光度值调整在0.2~0.8之间。同一实验使用同一规格的同一套比色皿,以减少测量误差,所以用普通分光光度法不适用于高含量或较低含量物质的测定。