基本信息
分子式 | C17H17BrN2O5 |
分子量 | 409.23 |
MDL编码 | MFCD00218213 |
存储条件 | Freezer -20℃ |
产品描述
HA14-1是一种Bcl-2表面口袋的非肽配体,IC50为9 μM左右。
靶点(IC50 & Targe)
Bcl-2,9μM
体外研究
HA14-1是 Bcl-2的小分子非肽配体,分子量为409,IC50 约为 9 μM。HA14-1 通过激活caspase而诱导HL-60细胞凋亡,这种作用具有剂量依赖性。[1] HA14-1作用于滤泡性淋巴瘤细胞系HF1A3, HF4.9 和 HF28RA,具有细胞毒性,LC50分别为4.5 μM, 12.6 μM 和8.1 μM。HA14-1 通过caspase 和 ROS诱导HF1A3, HF4.9 和 HF28RA细胞凋亡。[2]
体内研究
HA14-1(400 nM)处理免疫缺陷小鼠,对胶质母细胞瘤的生长没有任何重大影响。但是,HA14-1(400 nM)在体内促进DNA损伤剂Etoposide (2.5 mg/Kg) 对胶质母细胞瘤生长的作用效果。[3]
激酶实验
亲和测定:
根据荧光偏振,通过竞争性结合测定法,测定在体外有机化合物与 Bcl-2蛋白结合的亲和力。实验中,5-羧基荧光素偶联到肽的N末端,GQVGRQLAIIGDDINR来Bak的BH3结构域(Flu-BakBH3),高亲和力结合到Bcl-xL蛋白的表面口袋中。根据我们的分子模拟研究和利用荧光偏振进行结合测定,Flu-BakBH3肽结合到Bcl-2的表面口袋具有相似的亲和力。实验中Bcl-2作为重组GST融合的可溶性蛋白。在标准缓冲液环境下,在有或无有机化合物时,Flu-BakBH3 和 Bcl-2蛋白混合温育30分钟。使用双路径长度石英池(500 μl),在配备偏振光片的LS-50荧光光谱仪上测量Flu-BakBH3与Bcl-2蛋白的结合力。通过测定不同浓度化合物抑制Flu-BakBH3与Bcl-2结合的能力而测评不同化合物与Bcl-2蛋白的结合亲和力。
细胞实验
Cell lines: HF1A3, HF4.9 和 HF28RA
Concentrations: 0-25 μM
Incubation Time: 20 小时
Method:通过MTT法测定HA14-1作用于不同 FL 细胞系的毒性。在有或无HA14-1的情况下,细胞(5000/每孔)按一式三份在96孔板中 37°C下温育20小时。然后每孔加入MTT 溶液。在37°C下温育4小时后, 使用96孔板酶标仪测定光密度(OD)。使用以下公式: 细胞存活百分数=(实验组OD值/对照组OD值) × 100。绘制S型剂量反应曲线,使用Prism 4.0软件计算50% 致死浓度值(LC50) 。
(Only for Reference)
动物实验
Animal Models: 携带 BeGBM 移植瘤的雌性Swiss裸鼠
Formulation: HA14-1 在100 μL free RPMI 1640-50% DMSO中配制
Dosages: 400 nM
Administration: 在细胞注射位点注射
(Only for Reference)
参考文献
[1] Wang JL, et al. Proc Natl Acad Sci, 2000, 97(13), 7124-7129.
[2] Skommer J, et al. Leuk Res, 2006, 30(3), 322-331.
[3] Manero F, et al. Cancer Res, 2006, 66(5), 2757-2764.
安全信息
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